Головна Симптоми Как да извършите PCR диагностика. Анализ с помощта на метода PCR. Висока чувствителност на изследването

Как да извършите PCR диагностика. Анализ с помощта на метода PCR. Висока чувствителност на изследването

PLR (полимеразна реакция на Ланцуг) е постижение на молекулярната биология, един от основните методи за клинична лабораторна диагностика в края на 20-ти век и началото на 21-ви век, който носи голяма вреда на различни пациенти на медицинската наука.

По такъв начин, тъй като в средата на милиони клетки на човешкото тяло, не се унищожава самият жив вирус, а само част от неговата ДНК, тогава PLR, тъй като не може да се притеснява, може да се опитва да избегне задачата и да информира за присъствието на „извънземното“ положителен резултат. Същността на PLR е основното му предимство.

Хидратация и недостатъци

Лабораторията, която извършва PLR диагностика, има голяма нужда от наличие на тест системи и квалификация на медицинския персонал. Това е високотехнологична лаборатория, която разполага с добре подреден арсенал от високочувствителни и високо специфични реактиви, така че няма особени дефицити. Всичко, което показва положителен резултат при липса на клинични прояви и по този начин поставя лекаря пред дилема: да започнем ли лечение или не?

Лекарят, който се грижи за пациента, започва да се съмнява в надеждността на резултатите от теста, стига да няма признаци на заболяване. Въпреки това, високата чувствителност на PLR системата се основава на паметта, че тя разкрива сигнал за събуждане на предклиничния етап, а положителният резултат в този случай е по-рано от една година, а не далеч. Въз основа на това лекарят е отговорен за вземането на собствени решения относно полезността на терапията, като взема предвид други аргументи „за“ и „против“.

Предимствата на диагностиката с помощта на полимеразната реакция на Lanziug са очевидни:

Висока специфичност, който достига 100%, се дължи на наличието в пробата на частици от нуклеинови киселини, които са мощни в даден организъм или чужди за хората;
Висока производителности дори PLR е високотехнологична автоматизирана техника, която позволява провеждането на тестове в деня на вземане на материала и рутинно лечение на пациента в случай на тревожност;
PLR, работейки върху една повреда, може да извърши серия от разследвания за разкриват редица празницисякаш тя би била такова съкровище. Например, при диагностициране на хламидийна инфекция, когато PLR се прилага към основните методи, за да се определи хламидиите, може да се открие Neisser (гонококи) - алармист. Освен това няма отрицателно въздействие върху надеждността на резултатите;
Тестване чрез PLR метод разкрива опасни микроорганизми по време на инкубационния периодАко болестта все още не е достигнала края на тялото, тогава ранната диагностика предвижда бъдещото развитие на патологичния процес, което прави възможно да се подготвим за нещо ново и да го приемем от цялото.

Освен това, за да се елиминира объркването, което понякога възниква по време на диагностицирането, PLR се защитава с факта, че неговите резултати могат да бъдат записани (снимка, компютър), като се използва методът на тяхното викоризиране при експерти за цели, които може да са необходими.

Нормата при типовете PLR е да се оценяват отрицателни резултати, което показва наличието на фрагменти от чужди нуклеинови киселини, положителното доказателство показва наличието на инфекция в тялото, цифровите стойности показват силата на вируса и неговата концентрация по време на тестването. Протео външно дешифрира анализа на този лекар, който е направил специално изследване на тема „PLR“. Няма смисъл да се опитвате сами да интерпретирате резултатите, тъй като можете, веднага щом всичко се случи, да разберете погрешно и да започнете да се хвалите.

От какво се страхува PLR, какво може да направи и как можем да се подготвим за него?

Както всяко друго разследване, Понякога резултатите от теста са положителни или отрицателни, de PLR не е виновен. В ситуации като тази може да възникне следното:

Нарушаване на технологичния процес до един от етапите на реакцията;
Недодържани правила за събиране на материал, неговото съхранение и транспортиране;
Наличието на елементи на трети страни в материала.

Тоест, преди PLR - диагностика на инфекции, е необходимо да се подходи с уважение, внимателно и точно, в противен случай материалът може да промени структурата си или напълно да се срине.

Етапи на PLR диагностика. Резултатите на Милков могат да бъдат нарушени на всеки етап от разследването.

PLR диагностиката на инфекциите попада в категорията на „златните стандарти“ сред другите лабораторни методи, така че могат да се използват за откриване на ежедневни заболявания на богатите, които на пръв поглед не предполагат нищо съществено.като мен:

Туберкулоза с различни локализации, пневмония (включително атипична пневмония, причинена от хламидия);
Детски инфекции (краве рубеола, заушка, чуруликане);
дифтерия;
салмонела;
Зоонозна инфекциозна болест - листериоза (заболяването се характеризира с различни симптоми, дължащи се на увреждане на лимфните възли, централната нервна система, вътрешните органи);
Заболяване, причинено от вируса на Epstein-Barr (инфекциозна мононуклеоза и др.);
Онкологична патология, провокирана от папиломавирусна инфекция (IDP от този тип);
Борелиоза (лаймска болест, енцефалит, пренасян от кърлежи);
Инфекция с Helicobacter pylori, причинена от микроба Helicobacter pylori, който живее във вулвата на човек. Доказано е, че Helicobacter pylori причинява развитието на рак на скутума или 12-цифровото дебело черво;
и на практика всичко.

PLR-диагностиката на инфекции, които се предават от държавата, е особено важна, когато фрагментите от болестта, крещящи по този начин, често преминават в труден час без никакви клинични прояви, след което, когато започне тежестта, започва дейността. , по този начин застрашават здравето и съсипват живота на детето. Използвайте i по същия начин. Действията от тях („факла“) се настройват незабавно и до IPŠ, след което останалите изискват разглеждане на доклада. Можете да научите повече за най-популярните методи в следващите раздели на статията.

Как да се подготвите правилно, за да получите надежден резултат?

Важно е да се отбележи, че подготовката за PLR е проста и не изисква специални усилия от страна на пациента. Необходимо е да подпишете три неудобни задачи:

Не се свързвайте със статията 24 години преди датата на анализа;
За да вземете и анализирате кръв от вена, трябва да дойдете на гладната лодка, но не можете да пиете, докато не говорите;
Дайте ми го при първа възможност (в стерилно бурканче, сложете го пред аптеката).

PLR може да се извърши във всяка биологична среда

PLR методът не пречи на „кръвожадността“, той използва биологична среда за предотвратяване на предаването на инфекциозни агенти. изберете – това, което трябва да се вземе за по-нататъшно изследване, ще бъде изпратено на лекаря.

По този начин, в търсене на алармата, в допълнение към кръвния анализ (въпреки че можем да подходим и в повечето случаи да продължим паралелно с друг материал), можете да използвате:

(Зрение на урогениталния тракт);
Изрезка от лигавиците на устата, конюнктивата, назофаринкса и артериите (за жени - от шийката на матката и мускулатурата, за мъже - от уретрата);
Слину;
сперма;
от предната лоза;
Плацентна тъкан и амниотична течност (амниотична течност);
Седиментация (след центрофугиране), например, за идентифициране на видовете IPSS и mycobacterium tuberculosis;
Храчки и плеврална течност със същото вещество;
ексудати;
Гръбначен мозък, ако има съмнение за инфекциозно увреждане на централната нервна система;
Биоптичен материал (биоптат), взет от черен дроб, 12-нокътно черво, щипка и др.

Преди гореспоменатото бих искал да добавя, че материалът за тестване във всички случаи, в изстъргванията и в наблюденията, ще бъде достатъчен, някои тестове по метода PLR не изискват много усилия, анализът е ограничен до много Микролитрите трябва да се вземат от микроепруветка тип Епендорф и да се изпратят на Vivchennia.

Болест и застой PLR

VIL и полимеразна реакция на Lanzug

Ако се подложите на анонимно изследване и имате положителен резултат, имуноблотинг диагностиката трябва да се повтори отново. След потвърждаване на диагнозата на пациента се предписват допълнителни изследвания:

Въз основа на допълнителните имунологични реакции на абсолютните стойности на броя на лимфоцитите CD 4 (имунокомпетентни клетки - Т-хелпери или бъбречни клетки), коя инфекция ни връхлита първо, след което те се консумират, техните основни органи не могат да унищожат „своите ” и на някой друг.” РНК вирусът, който циркулира в кръвната плазма, се приема за нормални клетки в тялото и не реагира на тях;
Откриване на РНК вирус чрез PLR метод и разпределение на концентрацията на вирусни частици въз основа на етапа, тежестта на патологичния процес и прогнозата въз основа на баланса на тези данни. Очевидно думата „норма“ липсва в плана, така че реакцията винаги е положителна, а дешифрирането на цифровите стойности попада в компетенцията на лекаря.

PLR и хепатит

PLR методът може да открие хепатит, най-често тестът се използва за диагностициране на хепатит, който е слабо диагностициран с други методи.

Вирусът на хепатит С (РНК) е отговорен за поведението си в човешкото тяло. Вклинен в генома на чернодробните клетки (хепатоцити), той остава там в точното време, което може да дойде след 2 или 20 години, така че лекарите го нарекоха „мъртвия убиец“. Хепатит С води до развитие на злокачествен процес в чернодробния паренхим, който се проявява в по-късните стадии. Имунната система не отбелязва всичко това, бъркайки вируса с хепатоцит. В много случаи обаче се генерират антитела срещу вируса и те не защитават имунната система. За диагностицирането на ELISA за хепатит С не е много информативно, тъй като показва, че вирусът е загубил следи и дали самият той е заразен, не е известно. В случаите на HCV инфекция настъпва самоизчезване, тъй като антителата срещу вируса се губят и продължават да циркулират завинаги (имунологична памет). PLR значително предшества създаването на антитела и може да открие вирусна частица в рамките на 1-1,5 дни, докато AT може да се появи на интервали от 2 месеца преди раждането.

PLR диагностиката в случаите, когато има съмнение за разпространение на вируса на хепатит С в човешкото тяло, е най-оптималният метод за изследване, тъй като е възможно да се разпознае само наличието на „законен враг“ в кръвта или чернодробната биопсия на пациента. .

Въпреки това, понякога може да има припадък, ако AT е положителен и резултатът от PLR е отрицателен. Този метод се използва, когато вирусът е с много ниска интензивност или когато „спящо“ навлезе в черния дроб, без да навлезе в кръвния поток. За да се разбере истината, се взема повторен анализ от пациента или дори повече от един.

Папиломавирусна инфекция

Тъй като не може да се случи самоинфекция, възможно е също така, без да показва нищо на себе си, да продължи дълго време в тялото на владетеля, който не подозирам за цената, тъй като PLR фрагментите не са разработени, и симптомите на болестта бяха ежедневни. Въпреки това, наличието на папиломавирусна инфекция, независимо дали е латентна или латентна, далеч не е полезно за здравето на човека и е особено опасно да носите вирусния тип, който причинява рак (типове 16, 18).

Най-често половината от населението страда от IDP, тъй като вирусът е по-вероятно да засегне женската част на тялото и особено шийката на матката, където различни видове вируси причиняват развитие на диспластични процеси, а след това и рак на шийката на матката, както и не толерирайте дисплазията и дайте воля на вируса. Така оста, полимеразната реакция на Lanzug разкрива вирусна ДНК и след това или „лошият“, или „добрият“ (онкогенен или неонкогенен) тип се установява в тялото на жената.

Други IPSS и TORCH инфекции

Очевидно полимеразната реакция на Lanczug може да открие всяка чужда структура, която се образува от нуклеинови киселини, което прави теста подходящ за идентифициране на всички SPS и TORCH инфекции, които не винаги се откриват. Възможно ли е да се правят толкова скъпи изследвания за идентифициране на гонококи, които са налични и са по-евтини?

TORCH инфекциите и IPSS са взаимосвързани, така че е важно да се определи коя група трябва да бъде присвоена една на друга. За тях може да бъде трудно да пораснат, тъй като няма да бъдат изложени на различни групи микроорганизми, които могат да бъдат предадени от държавата, или само за млади умове (имунен дефицит), или могат да станат по-малко интересни поради важността на възможното отрицателен приток по време на бременност и бременност.

PLR е основният метод за откриване на придобити инфекции

Развитието на клиничните прояви се основава на различни фактори, които се определят от силата само на PLR, които са основните задачи, както при ELISA, така и при като единичен потвърдителен тест, особено за симптоми на заболяване.Такава трудна ситуация може да бъде причинена от полимикробна инфекция, която освен очевидни заболявания включва и психични патогени.

Уреаплазмата най-често се наблюдава при двойки с микоплазма.Не е за нищо. Тези видове, подобно на хламидията, не са нито вируси, нито бактерии, те живеят в средата на клетките и могат да бъдат свързани с IPSS, въпреки че тяхното присъствие в здраво тяло също далеч не е необичайно. Така че, за да се отстрани здрав нос от болен човек, са необходими специални методи, като PLR се счита за най-надежден, като се вземат предвид особеностите на поведението на тези микроорганизми и т.н., а изследванията се оказват неефективни.

Какъв е въпросът (тип 1, 2) и който също се отнася до херпесвирус (тип 5), тогава ситуацията тук е двусмислена. Степента на заразяване на населението на Земята се доближава до 100%, така че в този период е много важно да се идентифицира вирусът и неговата доза, която играе особено важна роля за вирулентността, и дори при възрастни, вирусът живее в тялото му, той често не се поддава на жажда и не дава признаци на заболяване.

Ето защо не трябва да пренебрегвате предписанието на лекаря за такава реакция и дори в някои случаи полимеразната реакция на Lanzug е задължителен и необходим метод за лабораторна диагностика, който може да предпази от сериозни усложнения не само nku, но и малкия човек, като ако още не се беше родила.

Бихме искали да разберем, че такъв чудотворен метод като PLR служи на човечеството повече от 30 години. Когато правите този тест, не трябва да се ограничавате от риска от инфекциозни заболявания. Полимеразната реакция на Ланцуг, популяризирана в областта на молекулярната биология, е неразривно свързана с генетиката. успешно се свързва с криминален следовател, за да идентифицира определено лице, в корабна медицина за създаване на ветеринарна медицина, във ветеринарна медицина, като клиника за животни може да закупи имот на пътя, както и в други области (промишленост, селско правителство и др.).

Видео: PLR - същността на тази стагнация

Генетика на бактерии Информация за друга дейност.

Полимеразна реакция на Ланцуг

Полимеразната реакция на Lanczug е метод, който позволява голямо увеличение (амплификация) на определен брой ДНК молекули в анализираната проба (включително в биологичен материал или чиста култура).

Основните предимства на PLR като диагностичен метод в микробиологията са много висока чувствителност, която позволява откриването на изключително ниски концентрации на патогени в пробите, както и регулирана специфичност, която позволява откриване на Идентифицирайте същества по генерични, видови или подвидови ниво. Основната част от PLR се дължи на високата му чувствителност - пробите могат лесно да замърсят ДНК от положителната контрола или продукта на PLR, което ще доведе до отрицателно-положителна реакция. Това налага строги ограничения върху умовете, в които се извършва смесването на PLR и работата с готови PLR продукти.

Проведен PLR.Приготвя се реакционна смес за комбиниране на следните компоненти:

Видях ДНК от проследения екземпляр,

Буферни Розчин

Mg2+ йони (необходими за ензима),

Два праймера са едноверижни къси ДНК молекули (най-често с дължина от 18 до 24 нуклеотида), комплементарни на краищата на различни ДНК последователности, които се откриват.

Sumish дезоксинуклеотид трифосфати.

Устойчива на топлина ДНК полимераза (най-често викоризирана Taq полимераза - полимераза, наблюдавана в Термус aquaticus).

След това тази реакция може да бъде поставена в усилвател, който всъщност се програмира от термостат. В усилвателя се извършват 30-40 цикъла на температурни промени. Кожата от тези цикли се състои от три етапа (раздел. Фиг. 1):

Денатурация (температура 94°W) – водните копия се пукат и копията на ДНК се разминават.

Праймерите са паднали (температурата е около 50-60°C) – праймерите се добавят към краищата на ДНК последователностите. Междувременно, при ниски температури, издигането на изходните ДНК вериги от проследения фрагмент (ренатурация) е енергийно по-благоприятно, поради концентрацията на праймери в реакционната смес с много порядъци.В зависимост от концентрацията на ДНК в последователността (например, върху цикъла на кочана на PLR), реакцията на праймерите протича с намаляване на ДНК. Температурата на топене се избира въз основа на температурата на топене (денатурация) на праймерите.

Удължаване (температурата е 72 °C) – ДНК полимеразата произвежда праймери на дългата ДНК матрица. Температурата показва оптималната температура за производството на викоризирана ДНК полимераза.

Откриването на резултати варира в различните версии на PLR и е описано в раздела „Видове PLR“.

Динамика на PLR

В ранните PLR цикли редица двойни ДНК молекули, чийто размер се определя от позицията между местата за кацане на праймера, взаимодействат с кожния цикъл. По този начин се създават малък брой съществуващи ДНК молекули, които могат да бъдат извлечени (раздел. Фиг. 2).

По този начин, в ранните цикли, силата на продукта PLR се описва с формулата m*2 n, където m е добивът на ДНК на пробата, n е броят на циклите. След това реакцията достига плато. Това става чрез натрупване на реакционния продукт, намаляване на концентрацията на праймери и дезоксинуклеотид трифосфати, както и повишаване на концентрацията на пирофосфат (фиг. 3).

Riznovidi PLR

Конвенция PLR

В тази версия на PLR реакцията след това се определя броят на циклите (30-40), след което се анализира дали натрупването на вулканични ДНК молекули се е натрупало в реакционната смес.

Този вариант за стадиране на PLR при разширени вени като диагностичен метод е ясен метод. Положителната реакция показва наличието на следи от ДНК молекули, които се намират в изображението. Отрицателна реакция за информиране за съществуването му. Количествената оценка на изходните ДНК молекули е невъзможна чрез отговор на плато.

Основният метод за идентифициране на продукта е електрофореза върху агарозни или полиакриламидни гелове. PLR продуктите се разделят в гел под електрическо поле, за да се намали тяхното молекулно тегло. Гелът съдържа интеркалиращ берберис (флуоресциращ в ДНК-свързано състояние - най-често бромиден етид). По този начин, когато се изложи на ултравиолетова светлина, ще бъде възможно да се открие наличието или наличието на знак, който показва ДНК с необходимата молекулна маса. В часа на провеждане на PLR с диагностична цел винаги се поставя положителен и отрицателен контрол на реакцията, което води до едни и същи признаци (разр. Фиг. 4).

PLR в реално време

В тази версия на производството на PLR силата на продукта PLR в реакционната смес се регистрира непрекъснато по време на реакцията. Това дава възможност да се генерира реакционна крива (разр. Фиг. 3) и въз основа на нея да се извлекат редица различни ДНК молекули от частиците.

Един от видовете PLR, извършван в реално време, е с използването на vicoristic intercalating agent, който се добавя директно към реакционната смес (най-често vicoristic SYBRGreen). Друг тип е използването на един от видовете флуоресцентни сонди, които са свързани към пространството в средата на продукта на PLR, което позволява да се увеличи специфичността на откриването (раздел. Фиг. 5). Флуоресцентното откриване се извършва непрекъснато по време на реакцията.

В допълнение към възможността за бързо откриване, други предимства на PLR в реално време се разкриват в съответствие с конвенцията. Тази версия на PLR е по-проста, по-бърза и също така не изисква отваряне на епруветки с PLR продукти, което намалява замърсяването с други частици. Основният недостатък е по-високата производителност на усилвателя поради повишената способност за откриване на флуоресценция в сравнение с оригинала.

Цифров Килкисна PLR

Нов, скъп и все още малък вариант на PLR, който дава възможност за по-точно определяне на силата на ДНК в проба. В тази версия реакцията на сместа, която съдържа флуоресцентна боровинка, се разделя на голям брой микроскопични обеми (например капчици в емулсия). След преминаване на PLR се анализира коя част от капките има положителна реакция и видимо се наблюдава флуоресценция. Тази част ще бъде пропорционална на броя на ДНК молекулите, намерени във всеки индивид.

PLR от обратна транскрипция

Преди тази или друга версия на PLR се инхибира реакцията на обратна транскрипция (РНК към ДНК) с помощта на ензима ревертаза. По този начин този метод позволява прецизно идентифициране на РНК молекули. Това може да се използва за откриване на РНК вируси или за определяне на нивото на транскрипция (mRNA) на определен ген.

Малюнок 1. Etapi PLR. Грундовете са маркирани с червен цвят.

Малюнок 2.Натрупване на двойни ДНК молекули, заобиколени от праймери, по време на PLR.

Малюнок 3.Динамика на PLR реакцията при различни концентрации на ДНК молекули, открити в пробата. (a) – най-висока концентрация (b) – междинна концентрация (c) – най-ниска концентрация

Малюнок 4.Агарозна електрофореза на PLR продукти. K+ - положителна контрола (зад наличието на ДНК, която се открива). 1-7 - следващи следи (от които 1-2 са положителни, 3-7 - отрицателни). К-отрицателна контрола (видео ДНК сукана ДНК). В много случаи, в допълнение към целия продукт, се виждат повече светли неспецифични реакционни продукти (праймерни димери).

Малюнок 5.Методи за откриване под час на използване на PLR в час. (a) – интеркалирана барнбери – флуоресцира, когато е свързана с двойноверижна ДНК (b) – Сонда Taqman – флуоресценция възниква, когато ДНК сондата се разцепи от ДНК полимераза с 5'-3' ендонуклеазна активност за увреждане на флуоресцентната мембрана и гасител. (c) – MolecularBeacon сонда - флуоресценция се появява по време на хибридизация на сондата с целия фрагмент извън пространството на отдалечения флуорофор и пожарогасител (d) – LightCycler сонди - флуоресценция на акцептора се появява по време на хибридизация на сондите, прехвърлени nya (FRET).

Полимеразна верижна реакция (PLR, PCR – полимеразна верижна реакция) е метод за отстраняване на анонимни копия на ДНК фрагменти (гени) от биологичен вирус.

Същността на PLR като метод на молекулярната биология се състои в широкомащабното пробно копиране на песенния ген (удължаване на ДНК) с помощта на специални ензими в мозъка инвитро. Важна характеристика на PLR е премахването на копие на специфична част от ДНК (ген), която съответства на даден ум. Синоним на процеса на копиране на ДНК е „амплификация“. репликация на ДНК in vivoМожете също да използвате усилване. Въпреки това, в резултат на репликация, къси участъци от ДНК (максимум 40 000 нуклеотидни двойки) се усилват по време на полимеразната реакция на Lancug.

Основни принципи

Също така, PLR е карбоназното копиране на ДНК фрагменти in vitro по време на температурни цикли, които се повтарят. Как протича реакционният процес в рамките на един температурен цикъл?

Синтезът на нуклеотидното копие се осъществява от ензима ДНК полимераза. Въпреки това, за да работи кочанът, ензимът се нуждае от стартова платформа. Подобно на майданите, „праймерите“ (семена) действат като синтетични олигонуклеотиди с до 15-20 нуклеотида. Има два праймера (прав и обратен), те са комплементарни на участъците на ДНК шаблона и самият ДНК фрагмент, заобиколен от праймери, се копира от ДНК полимераза. Работата на полимеразата се състои в последователното добавяне на нуклеотиди, комплементарни към последователността на ДНК шаблона. Самият Тим в един температурен цикъл отново синтезира два нови ДНК фрагмента (тъй като ДНК молекулата е Доланцюжкова, тогава има две матрици). По този начин, в продължение на 25-35 цикъла, пробата натрупва милиарди копия на ДНК участъка, идентифициран от праймерите. Структурата на затворен цикъл може да бъде представена по следния начин:

ДНК денатурация (топене, разпадане на ДНК копия) – 95°C – 1 или 2 hvilin;
падане на праймери (праймерите се свързват с ДНК матрицата, температурата на този етап се определя от нуклеотидния състав на праймера) - 60 ° C (например) - 1 hvilina;
Елонгация на ДНК (полимеразата синтезира ДНК) - 72°C - 1 час (оставя се за час докато се синтезира фрагмента).

Практическата основа за тестване на метода на полимеразната реакция на Lanziug в лабораторията трябва да се състои от:

(или какво друго се нарича термоциклер);
системи за s (за визуализация на PLR резултати);
системи (за анализ на резултатите от PLR);
(За подготовка на проби);
комплект (механичен и електронен).

В допълнение към основното и спомагателно оборудване за пълното функциониране на PLR лабораторията има необходими материали: стерилни накрайници, епруветки, стелажи за епруветки и дозатори.

Реагентната база в първоначалната PLR лаборатория за провеждане на пълноценна полимеразна реакция на Ланкуг включва ензима ДНК полимераза с буфер, праймери (малки синтетични ДНК фрагменти, комплементарни на стъблото и края на анализираните участъци от ДНК матрицата), сбор от нуклеотиди (A, T, G, C). Пречистената вода също е абсолютно необходима.

Предимства на PLR метода

Висока чувствителност на изследването

Чувствителността на метода е такава, че може да се постигне амплификация на PLR и идентифициране на таргетната последователност в случая, когато това се случва веднъж на всеки 5 клетки.

Специфика на анализа

PLR позволява да се открие ДНК на специфичен инфекциозен агент в присъствието на ДНК на други микроорганизми и ДНК на организма гостоприемник, както и да се извърши генотипиране. Чрез специфичен избор на реакционни компоненти (праймери), можете незабавно да откриете ДНК на свързани микроорганизми.

Универсалността на PLR метода

Вдясно, за PLR-диагностика на инфекциозни заболявания и заразни заболявания при хората, можете да използвате същите знания, да следвате универсални процедури за подготовка на проби (проби) и извършване на анализ, както и подобни комплекти реактиви.

Спестяване на време

Важно предимство на PLR е броят на етапите на културална микробиологична работа. Подготовка на проби, провеждане на реакции и анализиране на резултатите с максимално облекчение и много автоматизация. Във всеки случай резултатите могат бързо да паднат до 4-5 години.

Ефективност на PLR метода

Широчина на изследвания клиничен материал

В резултат на полимеразната реакция на Lanczyg не само биологичен материал може да бъде отстранен от болестта, но и много други субстрати, в които ДНК молекулите могат да бъдат идентифицирани с висока умора, например вода, почва, хранителни продукти, микроорганизми , и още много.

Всички най-важни предимства на този уникален метод са висока чувствителност и специфичност, идентифициране на инфекциозен агент и генотипиране на всеки човешки ген, висока ефективност и спестяване на време, универсален. Няма практическа основа - настоящият PLR метод може да се използва широко в клиничната диагностика , медицинска практика и научни изследвания и богатство в други области.

Zastosuvannya PLR

Областите на стагнация на полимеразната реакция на Ланкуг в резултат на съвременния метод на молекулярната биология са разнообразни. Той е богат на обхвата на материалите, които могат да бъдат анализирани (почти всичко, от което ДНК може да се види по-ясно, може да бъде обект на изследване), както и избраните праймери. Основните области на прилагане на PLR:

клинична медицина

екология

наблюдение на развитието на dovkilla
анализ на хранителни продукти
анализ на генетично модифицирани организми (ГМО)

корабна медицина и съдебна медицина

Индивидуална идентификация
създаване на Отечество

фармакология

ветеринарна медицина

научни изследвания (молекулярна биология, генетика)

Организация на PLR лаборатория

Информация за договаряне

Име	За нас	Производство	Метод	Кат.№

PLR - диагностика на инфекции, незабавен и високоточен метод за откриване на различни инфекциозни заболявания. Каква е разликата между другите анализи?

Това съкращение се дешифрира като полимеразна реакция на Lanzug. Според Wikipedia Кери Мълис е родена през 1983 г., американска история. За приноса си му беше отказана Нобелова награда.

За последен път PLR победи само с помощта на научния метод, след което беше успешно установен от медицината. Същността на изследването се състои в разпознаването на инфекциозния агент въз основа на ДНК и РНК. Кожното заболяване, прониквайки в ДНК, променя структурата си в различен вид. При вида на променената ДНК лаборантът осъзнава как възниква болестта при хората. Сред другите предимства на PLR:

Характеристики на метода PLR:

Точност (корекциите са минимални и тяхната честота не надвишава 0,01%);
Чувствителност (тестът "брои" отделни бактерии в кръвта и намазките);
Специфичност (PLR открива инфекции, които често не се проявяват до важен етап);
Уникалност (анализ на резултатите в ситуации, когато други изследвания не разкриват нищо).

Резултати от PLR анализ

Как работи методът на реакцията на Lanzug и как се подготвяте преди анализ?

Реакцията на Lanzug в лабораторни мозъци предава умножаването на богати ДНК и РНК парцели чрез идентифициране на една и съща увредена част. Киселините се усилват (конюгират) с помощта на ензимни препарати. Използвайки vicoristic ензими, лаборантът премахва достатъчно копия на патогенния ДНК фрагмент, за да приведе в съответствие PLR от симптомите на тези и други заболявания, провокирани от инфекция.

По правило се анализират биологични материали, взети чрез проба или намазка. За идентификация (дешифриране на полово предавани инфекции) се взема намазка от епидермиса, шийката на матката или матката за PLR. Понякога використите също се бият.

За да потвърдите или откриете наличието на хепатит, токсоплазмоза или ХИВ, вземете кръв от вена. Кръвта, взета от пръста, често дава отрицателни млечни резултати. Мононуклеозата се диагностицира след събиране на материал от гърлото на муле. Туберкулозата може да бъде открита след събиране на храчки, както ясно се вижда при пациенти с рани.

Намазката от матката и шийката на матката за PLR е прост анализ, няма какво да се заблуждавате с него. 2-3 дни преди събитието ще бъдете насърчени да живеете официален живот. В наши дни за специална хигиена се използват геловете и млякото на натурална основа. Можете да пиете топла вода от чешмата. Спрете измиването - вечерта преди раната до лабораторията или лекарския кабинет.

Лечението на млечница с помощта на кремове, мехлеми, супозитории и спрейове, което се провежда, също е важно. Намазка се взема от първия таз след или непосредствено след менструация. За да получите точни резултати, се препоръчва да не ходите до тоалетната в продължение на 2-3 години, преди да вземете PLR цитонамазка.

При хора, които имат реакция на Lanziug, се взема тампон от уретрата. Биологичният материал се събира с помощта на стерилна сонда или памучен тампон, който се въвежда в семето. По време на процедурата може да почувствате лек дискомфорт или подуване на черния дроб. Хората също трябва да отделят много време за изучаване на секс и хигиена. Периодът преди анализа се предписва лечение с антибиотици и други лекарства. Ако дискомфортът продължава след събирането, препоръчително е да отидете в клиниката възможно най-скоро.

Приемливо е пациентът да се подложи на кръвни изследвания или цитонамазка от органите на пациента. Генетичният материал се поставя в устройство за PLR амплификация и там се добавят ензими. ДНК се нагрява до 90-95 ° C, докато ремъкът се оформи в шиш. Този процес се нарича денатурация. За един час работа на реактора от една проба на ДНК и РНК се създават хиляди копия за анализ (дешифриране на реакцията).

Резултати от диагностика на PLR

Реакцията на Lanzug показва тежестта на инфекцията и точно броя на очевидните усложнения. Разкриването на останалите скали е индивидуалното въвеждане на мутационни гени в човешката ДНК, за да се разкрие способността за промяна на генотипа.

Какво разкрива диагнозата PPR инфекция?

Декодирането на резултатите от анализа е ясно видимо за квалифициран лекар. Силата на реакцията на Lanczyg ни позволява да потвърдим или открием наличието на такива заболявания:

Както става ясно от този списък, PLR диагностиката предоставя на лекарите голямо разнообразие от високоспециализирани специалности без ограничени възможности. Методът може да се използва в пулмологията, вирусологията, инфекциозните болести, онкологията, гастроентерологията, хематологията, гинекологията и урологията.

PLR декриптиране: резултати

Анализите на реакцията на Lancug се оценяват от лекарите индивидуално за кожен пациент с очевидни патологии и хронични заболявания. Резултатите от PLR анализите показват, както беше казано по-горе, специфичните характеристики на патогенните бактерии. Докато се занимава с тях, лекарят определя степента на тежест и стадия на заболяването. Въз основа на тези показатели допълнително се определя дозировката на лекарствата и продължителността на курса на лечение.

Отрицателен PLR резултат означава, че събраният биологичен материал показва вируси или инфекции всеки ден. Положителният PLR е сигнал преди аларма. Също така е открита инфекция в кръвта и други биологични области на пациента.

Ако стойностите са минимални, можете да говорите за простото наличие на заболяване, а не само за активното развитие на заболяването. Един обикновен носител на инфекцията, който се проявява само в PPR, но не показва обичайните други симптоми, трябва постоянно да се консултира с лекар.

Важно е да не се паникьосвате и да запомните, че повечето вируси, известни на науката, могат да бъдат лекувани с антибактериални лекарства. Избирането им и замяната им с едно в случай на неефективност може да лиши лекаря от квалификацията, както се вижда от лечението на това и други заболявания.

Дешифрирането на PLR може да се извърши не само по преценка на лекаря, но и по преценка на властите. Често се страхуваме от жени, които планират да забременеят в близко бъдеще, за да избегнем възможността от полово предавани болести. При поставяне в регионалната консултация с пациента не е необходима задълбочена диагностика.

PLR се предписва на задължителни жени, които са имали малък брой аборти или аборти по различни причини. Преди EBC се извършва анализ, за да се идентифицират всички причини за възможно експулсиране на оплодената яйцеклетка.

Хората често извършват PLR след освобождаване, по време на някакъв вид ваканционна романтика или сватба. Диагностиката им помага да не застрашават живота си и здравето на потенциалните сексуални партньори.

Често PLR е единственият шанс за пациента да се възстанови от заболяване в ембрионален стадий, ако ненужният риск е усложнен от трудно пътуване.

Намазката с помощта на PLR метода за диагностициране на инфекциозни заболявания може да стане по-важна:

Директна диагностика на инфекциозни заболявания и заболявания.

Много традиционни методи за лабораторна диагностика разчитат на откриването на ежедневни заболявания по различни косвени признаци. Например, ELISA диагностиката се основава на протеини, открити в кръвта на пациента, които са продукти от разграждането на инфекциозни агенти, въз основа на които лекарят може да постави друга диагноза. Методът на PLR анализ осигурява директна индикация за наличието на специфична ДНК проба на заболяването в материала, взет от пациента.

Висока специфичност на PLR диагностиката.

По време на процеса на анализ изследваният материал разкрива ДНК фрагмент, който е специфичен и има сила за конкретен организъм – било то бактерия или вирус. Тази част от ДНК е уникална и не е типична за животинска инфекция на земята.

Висока чувствителност на PLR.

Инфекции могат да възникнат, ако материалът, взет от пациента, съдържа по-малко от една клетка от бактерии или вируси. Сравним с други имунологични и микробиологични диагностични методи: чувствителност на PLR анализ – 10-100 клетки на проба, други методи – 103-105 клетки.

0Масив (=> Анализи) Масив (=> 2) Масив (=>.html) 2

Гъвкавостта на PLR анализа.

За PLR изследване е възможно да се използват практически всякакви материали, които не са достъпни за изследване с други методи: слуз, изрезки, кръв, серум, храчка, еякулат, остъргвания от епителни клетки - фрагменти и др. Инфекцията може да възникне във всеки биологичен материали или тъкани.

Има висока степен на подкрепа за резултатите от PLR анализа.

Единен метод за цялата обработка на материал, взет от пациент за анализ, откриване на реакционни продукти, автоматизирана PLR амплификация позволява нова PLR диагноза след 4-5 години. В същото време се отделя много повече от час за културни методи за наблюдение - от много дни до много дни, тъй като е необходимо да се види и след това да се развие патогенът върху клетъчната култура.

Възможност за диагностициране на всякакъв вид инфекция.

Високата чувствителност на PLR метода позволява да се диагностицира инфекцията не само в острия стадий на заболяването, но и да се открият хронични инфекции и да се идентифицират отделни бактерии и вируси.

Намазка, използваща метода PLR, дава възможност за откриване на инфекции, които не могат да бъдат открити с намазка на флората: хламидия, уреаплазмоза, микоплазмоза, генитален херпес.

Какви са съществените предимства на метода на изследване и PLR диагностиката? Недостатъците на PLR диагностиката включват:

Възможност за получаване на положителен резултат

PLR анализът може да покаже положителен резултат, ако инфекцията вече е мъртва, „убита“ от антибиотици и мъртвите клетки все още се намират в тъканите на пациента. Как е възможно? Много лесно, много просто, съвсем лесно, съвсем просто. Например, инфекцията живее в тъканите на епитела (върху лигавицата на органите или очите). И двамата се наслаждаваха. Отнема един час, за да се „обнови” епитела на клетките. Ако материалът бъде взет от лекаря преди клетките да са напълно обновени, материалът може да съдържа мъртви клетки на инфекция. Klitini, очевидно, премахва генетичен материал - ДНК или РНК на тялото, което смята PLR . PLR не разделя мъртвите клетки от живите: той търси ДНК и ги „клонира“ в големи количества. Резултатът от такъв анализ е положителен. Всъщност е вярно, че сме хибнопозитивни.

Неспособността на PLR да „възстанови“ мъртва инфекция от жива затруднява откриването на PLR и контролирането на ефективността на лечението. Основното правило, разбира се, е да се гарантира, че мъртвите излишъци на инфекцията са напълно елиминирани от тялото, което средностатистическият човек преживява 4-8 години. Следователно, след приемане на останалите антибиотични таблетки, PLR методът може и трябва да се използва за проследяване на ефективността на лечението.

гастроентерология диагностичен комплекс - 5360 рубли

ТИЛКИ В БЕРЕЗНИ спестявания - 15%

1000 рубли Извличане на ЕКГ от дешифриране

- 25%първичен
Отиди на лекар
терапевт през почивните дни

980 търкайте. първа среща с хирудотерапевт

среща с терапевт - 1130 рубли (алтернативно 1500 рубли) „Само през седмицата, в събота и седмица, посещение на терапевт с 25% отстъпка - 1130 рубли, вместо 1500 рубли (диагностичните процедури се заплащат според ценовата листа)

На по-късен етап контролът на забраната може да се извърши с помощта на различен културен метод или чрез засяване: само живи микроорганизми, които се размножават, могат да служат като знак за ненасилие.

Не е препоръчително да се използва PLR анализ за диагностициране на гарднерелоза, тъй като гарднерелите - страдащите от това заболяване, в малък брой случаи, обикновено живеят в почвата. ДНК на тези бактерии с vicoristic PLR скоро ще бъде загубена. Gardnerella не се проявява в цитонамазка, а бактериоскопията в този случай е достатъчен метод за диагностициране на гарднерелоза и проследяване на лечението.
Разнообразие от микроорганизми

Всеки микроб може да се промени и в същото време като ДНК. Най-красивото дупе от този галус е грипният вирус. Веднъж болен, човек развива антитела срещу вируса. Чисто теоретично, ако сме се разболели от грип дори само веднъж, то точно както при грипа, не сме виновни, че ще се разболеем отново. Почти ни боли гърлото. Каква е причината? Вирусът „мутира“, леко „променяйки“ своя геном и нашата имунна система, нашите антитела вече не „разпознават“ стария гост в нов вид. Не е лудост, че отново се разболявам от грип...

При проектирането на усилвател (PLR тестова система) се избира специфичен за даден микроорганизъм ДНК фрагмент, който е най-малко податлив на промяна. Той е „избран“ от така наречената силно консервативна част на ДНК. Като алтернатива, изобилието от микроорганизми може да доведе до факта, че определени генотипове или щамове на наблюдавания организъм могат да причинят мутации в генома, който се усилва (клонира) и по този начин става неуловим, даден от тестовата система.

По този начин различните системи за тестване са една от причините, поради които анализите, извършени в различни лаборатории и в различни клиники, използващи един и същ PLR метод, могат да покажат диаметрално различни резултати. За да се избегнат мутациите, доколкото е възможно, вече са разработени стандарти за регулиране на тестването (включително тестване за кръстосана реакция, както и тестване на домашни щамове, които са посочени), което изисква система за тестване, първото нещо, което трябва да се появи на пазара и Ще се използва ли Vicoristan за диагностициране на вашето здраве Защо добрите клиники и лаборатории използват Vicoristan за останалите поколения тест системи. А нашият медицински център „Евромедпрестиж” е един от малкото, които могат да осигурят на своите клиенти ясна диагностика.