Golovna Síntomas Cómo realizar el diagnóstico por PCR Análisis mediante el método PCR. Alta sensibilidad de la investigación.

Cómo realizar el diagnóstico por PCR Análisis mediante el método PCR. Alta sensibilidad de la investigación.

La PLR (reacción de la polimerasa de Lanzug) es un logro de la biología molecular, uno de los principales métodos de diagnóstico de laboratorio clínico de finales del siglo XX y principios del XXI, que causa un gran daño a varios pacientes de la ciencia médica.

De esta manera, como en medio de millones de células del cuerpo humano, no es el virus vivo en sí el que se destruye, sino sólo una parte de su ADN, entonces el PLR, como no puede ser molestado, puede estar intentando informar sobre la presencia del “extraterrestre” un resultado positivo. La esencia del PLR es su principal ventaja.

Hidratación y carencias.

Un laboratorio que realiza diagnósticos PLR tiene una gran necesidad de disponibilidad de sistemas de prueba y de las calificaciones del personal médico. Se trata de un laboratorio de alta tecnología que cuenta con un arsenal bien ordenado de reactivos altamente sensibles y específicos, por lo que no hay escasez especial. Todo lo que muestra un resultado positivo en ausencia de manifestaciones clínicas y, por tanto, pone al médico ante un dilema: ¿debemos iniciar el tratamiento o no?

El médico que atiende al paciente comienza a dudar de la fiabilidad de los resultados de las pruebas, siempre que no haya signos de enfermedad. Sin embargo, la alta sensibilidad del sistema PLR se basa en la memoria de que revela una llamada de atención en la etapa preclínica, y un resultado positivo en este caso es antes de un año, ni mucho menos. En base a esto, el médico es responsable de tomar sus propias decisiones sobre la utilidad de la terapia, teniendo en cuenta otros argumentos “a favor” y “en contra”.

Las ventajas del diagnóstico mediante la reacción de la polimerasa de Lanziug son obvias:

Alta especificidad, que alcanza el 100%, se debe a la presencia en la muestra de partículas de ácidos nucleicos que son potentes en un organismo concreto o extrañas a los humanos;
Alta productividad, e incluso PLR es una técnica automatizada de alta tecnología que permite realizar pruebas el día de la recolección del material y tratar al paciente de forma rutinaria en caso de cualquier ansiedad;
PLR, trabajando en una avería, puede llevar a cabo una serie de investigaciones y revelar una serie de días festivos como si ella fuera un tesoro. Por ejemplo, al diagnosticar una infección por clamidia, cuando se aplica PLR a los métodos principales, para tratar la clamidia se puede detectar Neisser (gonococo), un alarmista. Además, no hay ningún impacto negativo en la fiabilidad de los resultados;
Pruebas utilizando el método PLR revela microorganismos peligrosos durante el período de incubación Si la enfermedad aún no ha llegado al final del cuerpo, entonces el diagnóstico temprano anticipa el desarrollo futuro del proceso patológico, lo que permite prepararse para algo nuevo y aceptarlo como un todo.

Además, para eliminar las confusiones que a veces surgen durante el diagnóstico, PLR también se protege con el hecho de que sus resultados pueden ser registrados (fotografía, ordenador) utilizando el método de corrección experto para los fines que sean necesarios.

La norma en los tipos de PLR es valorar los resultados negativos, que indica la presencia de fragmentos de ácidos nucleicos extraños, una evidencia positiva indica la presencia de infección en el cuerpo, los valores digitales indican la fuerza del virus y su concentración en el momento de la prueba. Proteo descifró externamente el análisis de este médico, que ha realizado un estudio especial sobre el tema “PLR”. No tiene sentido intentar interpretar los resultados por tu cuenta, ya que puedes, en cuanto todo pase, malinterpretar y empezar a alardear.

¿A qué le teme el PLR, qué puede hacer y cómo podemos prepararnos para ello?

Como cualquier otra investigación, A veces los resultados de la prueba son positivos o negativos., el PLR no tiene la culpa. En situaciones como esta puede ocurrir lo siguiente:

Interrupción del proceso tecnológico en una de las etapas de la reacción;
Normas Nedotrimannya para la recogida de material, su conservación y transporte;
La presencia de elementos de terceros en el material.

Es decir, antes del diagnóstico de infección por PLR, es necesario abordarlo con respeto, cuidado y precisión, de lo contrario el material puede cambiar su estructura o colapsar por completo.

Etapas del diagnóstico PLR. Los resultados de Milkov pueden verse alterados en cualquier etapa de la investigación.

El diagnóstico de infecciones por PLR entra dentro de la categoría de "estándares de oro" entre otros métodos de laboratorio, por lo que se pueden utilizar para la detección de enfermedades cotidianas que, a primera vista, no indican nada grave:

Tuberculosis de diversas localizaciones, neumonía (incluida la neumonía atípica causada por clamidia);
Infecciones infantiles (rubéola de vaca, paperas, chirrido);
Difteria;
Salmonela;
Enfermedad infecciosa zoonótica: listeriosis (la enfermedad se caracteriza por una variedad de síntomas debido al daño a los ganglios linfáticos, el sistema nervioso central y los órganos internos);
Enfermedad causada por el virus de Epstein-Barr (mononucleosis infecciosa, etc.);
Patología oncológica provocada por infección por papilomavirus (PDI de este tipo);
Boreliosis (enfermedad de Lyme, encefalitis transmitida por garrapatas);
Infección por Helicobacter pylori, causada por el microbio Helicobacter pylori, que vive en la vulva de una persona. Se ha comprobado que Helicobacter pylori provoca el desarrollo de cáncer de escudo o colon de 12 dígitos;
y prácticamente todo.

El diagnóstico PLR de infecciones transmitidas por enfermedades es especialmente importante cuando las enfermedades que ocurren de esta manera a menudo pasan durante mucho tiempo sin ninguna manifestación clínica, pero luego comienzan a activarse cuando la enfermedad persiste y, de esta manera, poner en peligro la salud y dañar la vida del niño. Mueve yo de la misma manera. Sus acciones ("antorcha") se establecen inmediatamente y hasta ІПШ, luego el resto requiere la consideración del informe. Puede obtener más información sobre los métodos más populares en las siguientes secciones del artículo.

¿Cómo prepararse correctamente para obtener un resultado fiable?

Es importante señalar que la preparación para la PLR es sencilla y no implica ningún esfuerzo especial por parte del paciente. Es necesario firmar tres tareas incómodas:

No contactar el artículo 24 años antes de la fecha del análisis;
Para recolectar y analizar sangre de una vena, debes venir al bote de ayuno, pero no puedes beber hasta que hables;
Dámelo lo antes posible (en un frasco esterilizado, puesto frente a la farmacia).

PLR se puede utilizar en cualquier entorno biológico.

El método PLR no interfiere con la “sed de sangre”; utiliza un medio biológico para prevenir la transmisión de agentes infecciosos. seleccione: lo que se debe tomar para una investigación adicional se enviará al médico.

De esta manera, en busca de la alarma, además de los análisis de sangre (aunque también podemos acercarnos y, en la mayoría de los casos, proceder en paralelo a otro material), se puede vikorizar:

(Visión del tracto urogenital);
Un trozo de membranas mucosas de la boca, conjuntiva, nasofaringe y arterias (para las mujeres, tomado del cuello uterino y la musculatura, para los hombres, de la uretra);
Slinu;
Esperma;
de la vid delantera;
Tejido placentario y líquido amniótico (líquido amniótico);
Sedimentación (después de la centrifugación), por ejemplo, para identificar tipos de IPSS y Mycobacterium tuberculosis;
Esputo y líquido pleural con esta misma sustancia;
exudados;
Médula espinal si existe sospecha de lesión infecciosa del sistema nervioso central;
Material de biopsia (bioptat), extraído del hígado, intestino de 12 garras, escudo, etc.

Antes de lo anterior, quisiera agregar que el material para probar en todos los casos, en los raspados y en las observaciones, será suficiente, algunas pruebas por el método PLR no requieren mucho esfuerzo, el análisis se limita a Muchos microlitros deben tomarse de un microtubo tipo Ependorf y enviarse a Vivchennia.

Enfermedad y estancamiento PLR

Reacción de VIL y polimerasa de Lanzug.

Si se somete a pruebas anónimas y obtiene resultados positivos, los diagnósticos de inmunotransferencia deben repetirse nuevamente. Una vez confirmado el diagnóstico, al paciente se le prescriben investigaciones adicionales:

Basado en reacciones inmunológicas adicionales de los valores absolutos del número de linfocitos CD 4 (células inmunocompetentes, células T auxiliares o células renales), que la infección nos ataca primero, después de lo cual gastan su Y las autoridades principales no pueden destruir " “propios” y “de otra persona”. El virus ARN que circula en el plasma sanguíneo se confunde con células normales del cuerpo y no reacciona ante ellas;
Detección de virus ARN por el método PLR y distribución de la concentración de partículas virales en función del estadio, la gravedad del proceso patológico y el pronóstico en función del equilibrio de estos datos.. Obviamente, en el plan falta la palabra “norma”, por lo que la reacción siempre es positiva y descifrar los valores digitales es competencia del médico.

PLR y hepatitis

El método PLR puede detectar hepatitis; la mayoría de las veces la prueba se usa para diagnosticar la hepatitis, que no se diagnostica bien con otros métodos.

El virus de la hepatitis C (ARN) es responsable de su comportamiento en el cuerpo humano. Atrapado en el genoma de las células del hígado (hepatocitos), permanece allí en el momento adecuado, que puede llegar en 2 o 20 años, por lo que los médicos lo llaman "el asesino de los muertos". La hepatitis C conduce al desarrollo de un proceso maligno en el parénquima hepático, que se manifiesta en etapas posteriores. El sistema inmunológico no marca todo esto, confundiendo el virus con un hepatocito. Sin embargo, en muchos casos se generan anticuerpos contra el virus y no protegen un sistema inmunológico sano. Para el diagnóstico de ELISA para la hepatitis C, no es muy informativo, ya que indica que el virus ha perdido rastros y se desconoce si está infectado. En los casos de infección por VHC se produce una autoextinción, ya que los anticuerpos contra el virus se pierden y continúan circulando para siempre (memoria inmunológica). PLR precede significativamente a la creación de anticuerpos y puede detectar una partícula viral entre 1 y 1,5 días, mientras que AT puede aparecer a intervalos de 2 meses antes del parto.

El diagnóstico PLR en los casos en los que se sospecha que el virus de la hepatitis C se propaga en el cuerpo humano es el método de investigación más óptimo, ya que sólo es posible reconocer la presencia de un "enemigo legal" en la sangre o en la biopsia hepática de un paciente. .

Sin embargo, a veces puede haber una convulsión si el AT es positivo y el resultado del PLR es negativo. Este método se utiliza cuando el virus tiene una intensidad muy baja o cuando ingresa “latentemente” al hígado sin ingresar al torrente sanguíneo. Para saber la verdad se toma un nuevo análisis del paciente, o incluso más de uno.

Infección por virus del papiloma

Dado que la autoinfección no puede ocurrir, también es posible, sin mostrarse nada, persistir durante mucho tiempo en el cuerpo del gobernante, de quien no sospecho sobre el precio, ya que los fragmentos de PLR no fueron desarrollados. y los síntomas de la enfermedad eran diarios. Sin embargo, la presencia de una infección por virus del papiloma, ya sea latente o latente, está lejos de ser buena para la salud de una persona, y es especialmente peligroso portar el tipo de virus que causa cáncer (tipos 16, 18).

Muy a menudo, la mitad de la población sufre de PDI, ya que es más probable que el virus infecte el cuello uterino femenino, y especialmente el cuello uterino, donde diferentes tipos de virus provocan el desarrollo de procesos displásicos y luego cáncer de cuello uterino, ya que curan la displasia y dan rienda suelta al virus. Entonces, el eje, la reacción de la polimerasa de Lanzug, revela el ADN viral, y luego el tipo "malo" o "bueno" (oncogénico o no oncogénico) se instala en el cuerpo de la mujer.

Otras infecciones por IPSS y TORCH

Obviamente, la reacción de la polimerasa de Lanczug puede detectar cualquier estructura extraña que se forme a partir de ácidos nucleicos, por lo que la prueba es adecuada para detectar todas las infecciones por SPS y TORCH, que no siempre se detectan. ¿Es posible realizar investigaciones tan costosas para identificar gonococos, que están disponibles y son más baratas?

Las infecciones por TORCH y el IPSS están interconectadas, por lo que es importante determinar qué grupo debe asignarse entre sí. Puede resultarles difícil crecer, ya que es posible que no estén expuestos a diferentes grupos de microorganismos que pueden transmitirse mediante métodos estatales o sólo a mentes jóvenes (inmunodeficiencia), y pueden volverse menos interesantes por su volatilidad, lo que provoca una posible afluencia negativa durante embarazo y embarazo.

PLR es el principal método para detectar infecciones adquiridas

El desarrollo de las manifestaciones clínicas se basa en varios factores, que están determinados por el poder únicamente del PLR, que son las tareas principales, tanto con ELISA como también con como prueba única de confirmación, especialmente para síntomas de enfermedad. Una situación tan difícil puede ser causada por una infección polimicrobiana que, además de las enfermedades obvias, también incluye patógenos mentales.

El ureaplasma se observa con mayor frecuencia en parejas con micoplasma. No es en vano. Estas especies, al igual que la clamidia, no son virus ni bacterias, viven en el medio de las células y pueden estar asociadas con el IPSS, aunque su presencia en un cuerpo sano tampoco es infrecuente. Entonces, para crear una nariz sana a partir de una persona enferma, se requieren métodos especiales, donde el PLR se considera el más confiable, dependiendo del comportamiento específico de estos microorganismos, las investigaciones resultan ineficaces.

¿Cuál es el problema (tipo 1, 2) y qué también se relaciona con el virus del herpes (tipo 5)? Entonces la situación aquí es ambigua. La tasa de infección de la población mundial se acerca al 100%, por lo que en este período es muy importante identificar el virus y su dosis, que influye especialmente en la virulencia, incluso en personas adultas el virus ha sobrevivido en su cuerpo. , a menudo no provoca sed y no da signos de enfermedad.

Por lo tanto, no debe ignorar la prescripción del médico para tal afección, e incluso en algunos casos, la reacción de la polimerasa de Lanzug es un método obligatorio y necesario de diagnóstico de laboratorio, que puede proteger contra complicaciones graves no solo en las mujeres ku, ah, pequeños humanos. ser que aún no ha nacido.

Nos gustaría entender que un método tan milagroso como el PLR sirve a la humanidad desde hace más de 30 años. Al realizar esta prueba, uno no debe limitarse por el riesgo de enfermedades infecciosas. La reacción de la polimerasa de Lanzug, popularizada en el campo de la biología molecular, está indisolublemente ligada a la genética. contacta con éxito a un investigador criminal para identificar a una persona en particular, en medicina de barco para el establecimiento de medicina veterinaria, en medicina veterinaria, como clínica para animales se puede comprar propiedad en la carretera, así como en otras áreas (industria, gobierno rural, etc.).

Vídeo: PLR: la esencia de ese estancamiento

Genética de bacterias Información para otra actividad.

Reacción de la polimerasa Lanzug

La reacción de la polimerasa de Lanczug es un método que permite un gran aumento (amplificación) de una cantidad de moléculas de ADN en la muestra que se analiza (incluso en material biológico o cultivo puro).

Las principales ventajas del PLR como método de diagnóstico en microbiología son una sensibilidad muy alta, que permite detectar concentraciones extremadamente bajas de patógenos en muestras, así como una especificidad regulada, que permite identificar criaturas por género, especie o subespecífico. nivel. La mayor parte del PLR se debe a su alta sensibilidad: las muestras pueden contaminar fácilmente el ADN del control positivo o del producto PLR, lo que provocará una reacción negativa-positiva. Esto impone severas restricciones a las mentes en las que se lleva a cabo la mezcla de PLR y el trabajo con productos PLR terminados.

PLR realizado. Se está preparando una mezcla de reacción para combinar los siguientes componentes:

Vi ADN del espécimen rastreado,

Buferny Rozchin

Iones Mg2+ (necesarios para la enzima),

Dos cebadores son moléculas de ADN cortas monocatenarias (con mayor frecuencia de 18 a 24 nucleótidos de largo), complementarias a los extremos de diferentes secuencias de ADN que se detectan.

Sumish desoxinucleótidos trifosfatos.

ADN polimerasa resistente al calor (más a menudo Taq polimerasa vicorizada; polimerasa que se observa en termo acuático).

Luego, esta reacción se puede colocar en un amplificador, que en realidad está programado por un termostato. En el amplificador se realizan entre 30 y 40 ciclos de cambios de temperatura. La piel de estos ciclos consta de tres etapas (div. Fig. 1):

Desnaturalización (temperatura 94 °C): las lanzas de agua estallan y las lanzas de ADN divergen.

Los cebadores han caído (la temperatura ronda los 50-60°C): los cebadores se añaden a los extremos de las secuencias de ADN. En general, a una temperatura más baja, el aumento de la producción de ADN a partir del fragmento trazado (renaturalización) es energéticamente más eficiente, debido a que la concentración de cebadores en la mezcla de reacción es muchos órdenes de magnitud mayor que la concentración de ADN en la secuencia (por ejemplo, (por ejemplo, en los ciclos cob de PLR), por lo tanto la reacción de los cebadores se produce a través del ADN. La temperatura de fusión se selecciona en función de la temperatura de fusión (desnaturalización) de los cebadores.

Elongación (temperatura 72 °C): la ADN polimerasa produce cebadores de la larga matriz de ADN. La temperatura indica la temperatura óptima para la producción de ADN polimerasa vicorizada.

La detección de resultados varía en las diferentes versiones de PLR y se describe en la sección "Tipos de PLR".

Dinámica del PLR

En los primeros ciclos de PLR, varias moléculas dobles de ADN, cuyo tamaño está determinado por la posición entre los sitios de aterrizaje del cebador, interactúan con el ciclo de la piel. De esta manera se crea una pequeña cantidad de moléculas de ADN existentes que se pueden extraer (div. Fig. 2).

Por lo tanto, en los primeros ciclos, la fuerza del producto PLR se describe mediante la fórmula m*2 n, donde m es el rendimiento de la muestra de ADN, n es el número de ciclos. Entonces la reacción llega a una meseta. Esto se produce mediante la acumulación del producto de reacción, una disminución en la concentración de cebadores y trifosfatos de desoxinucleótidos, así como un aumento en la concentración de pirofosfato (Fig. 3).

Riznovidi PLR

Convención PLR

En esta versión de la reacción PLR, luego se selecciona el número de ciclos (30-40), después de lo cual se analiza si se han acumulado moléculas de ADN volcánico en la mezcla de reacción.

Esta opción de estadificación del PLR en caso de varices como método de diagnóstico es un método claro. Una reacción positiva indica la presencia de rastros de moléculas de ADN que se encuentran en la imagen. Reacción negativa al informar sobre su existencia. Una evaluación cuantitativa de las moléculas de ADN producidas no es posible mediante la respuesta a una meseta.

El principal método para identificar el producto es la electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida. Los productos PLR se separan en un gel bajo un campo eléctrico para reducir su peso molecular. El gel contiene agracejo intercalado (fluorescente en estado ligado al ADN, generalmente bromuro de eturo). Así, al exponerse a la luz ultravioleta, será posible detectar la presencia o presencia de una marca que indica el ADN de la masa molecular requerida. Durante la hora de realización de la PLR con fines de diagnóstico, siempre se realiza un control positivo y negativo de la reacción, lo que da como resultado los mismos signos (div. Fig. 4).

PLR en tiempo real

En esta versión de la producción de PLR, la fuerza del producto PLR en la mezcla de reacción se registra continuamente durante el transcurso de la reacción. Esto permite generar una curva de reacción (ver Fig. 3) y, a partir de ella, extraer de las partículas varias moléculas de ADN diferentes.

Uno de los tipos de PLR que se lleva a cabo en tiempo real es mediante el uso de un agente intercalante vicorístico, que se añade directamente a la mezcla de reacción (más a menudo vicorístico SYBRGreen). Otro tipo es el uso de uno de los tipos de sondas fluorescentes que están conectadas al espacio en el medio del producto PLR, lo que permite aumentar la especificidad de la detección (div. Fig. 5). La detección de fluorescencia se lleva a cabo de forma continua durante la reacción.

Además de la posibilidad de una detección rápida, según la convención se revelan otras ventajas del PLR en tiempo real. Esta versión de PLR es más sencilla, rápida y además no requiere abrir tubos con productos PLR, lo que reduce la contaminación de otras partículas. La principal desventaja es el mayor rendimiento del amplificador debido a la mayor capacidad de detectar fluorescencia en comparación con el original.

PLR digital de Kilkisna

Una variante de PLR nueva, costosa y aún de baja amplitud, que permite determinar con mayor precisión la fuerza del ADN en una muestra. En esta versión, la reacción de la mezcla, que contiene bérbero fluorescente, se divide en una gran cantidad de volúmenes microscópicos (por ejemplo, gotas en una emulsión). Después de someterse a PLR, se analiza qué parte de las gotitas tiene una reacción positiva y, aparentemente, se observa fluorescencia. Esta porción será proporcional al número de moléculas de ADN que se encuentren en cada individuo.

PLR de transcripción inversa

Antes de esta u otra versión de PLR, se inhibe la reacción de transcripción inversa (ARN a ADN) con la ayuda de la enzima revertasa. Por tanto, este método permite la identificación precisa de moléculas de ARN. Esto se puede utilizar para detectar virus de ARN o para determinar el nivel de transcripción (ARNm) de un gen en particular.

Malyunok 1. Etapi PLR. Las imprimaciones están marcadas con un color rojo.

Malyunok 2. Acumulación de moléculas dobles de ADN, rodeadas de cebadores, durante la PLR.

Malyunok 3. Dinámica de la reacción PLR a diferentes concentraciones de moléculas de ADN encontradas en la muestra. (a) – concentración más alta (b) – concentración intermedia (c) – concentración más baja

Malyunok 4. Electroforesis en agarosa de productos PLR. K+ - control positivo (detrás de la presencia de ADN que se está detectando). 1-7 - signos adicionales (de los cuales 1-2 son positivos, 3-7 - negativos). Control K-negativo (vídeo ADN sukana ADN). En muchos casos, además del producto completo, se ven más productos de reacción ligeros e inespecíficos (dímeros de cebador).

Malyunok 5. Métodos de detección bajo la hora de vikoristannya PLR en la hora. (a) – percebe intercalado – fluoresce cuando se une a ADN bicatenario (b) – Sonda Taqman – la fluorescencia ocurre cuando la sonda de ADN es escindida por una ADN polimerasa con actividad endonucleasa 5'-3' en la base del fluoróforo en ese extintor. (c) – Sonda MolecularBeacon: la fluorescencia aparece durante la hibridación de la sonda con el fragmento completo detrás del espacio del fluoróforo remoto y el extintor (d) – Sondas LightCycler: la fluorescencia del aceptor aparece durante la hibridación de las sondas transferidas (FRET).

La reacción en cadena de la polimerasa (PLR, PCR) es un método para eliminar copias anónimas de fragmentos de ADN (genes) de un virus biológico.

La esencia del PLR como método de biología molecular radica en la copia de muestra a gran escala del gen Song (extensión del ADN) con la ayuda de enzimas especiales en el cerebro. in vitro. Una característica importante del PLR es la eliminación de una copia de una parte específica de ADN (gen) que corresponde a una mente determinada. Un sinónimo del proceso de copia del ADN es "amplificación". replicación del ADN en vivo También puedes utilizar amplificación. Sin embargo, como resultado de la replicación, se amplifican secciones cortas de ADN (máximo 40.000 pares de nucleótidos) durante la reacción de la polimerasa Lancug.

Principios básicos

Además, PLR es una copia con dióxido de carbono de fragmentos de ADN in vitro durante ciclos de temperatura que se repiten. ¿Cómo ocurre el proceso de reacción dentro de un ciclo de temperatura?

La síntesis de la lanza de nucleótidos se lleva a cabo mediante la enzima ADN polimerasa. Sin embargo, para que la mazorca funcione, la enzima necesita una plataforma de partida. Al igual que los Maidans, los "cebadores" (semillas) actúan como oligonucleótidos sintéticos con un total de 15 a 20 nucleótidos. Hay dos cebadores (directo e inverso), que son complementarios a las secciones de la plantilla de ADN y el fragmento de ADN en sí, rodeado de cebadores, es copiado por la ADN polimerasa. El trabajo de la polimerasa radica en la adición secuencial de nucleótidos complementarios a la secuencia del molde de ADN. El propio Tim, en un ciclo de temperatura, vuelve a sintetizar dos nuevos fragmentos de ADN (dado que la molécula de ADN es Dolantsyuzhkova, entonces hay dos matrices). Así, a lo largo de 25 a 35 ciclos, la muestra acumula miles de millones de copias del diagrama de ADN identificado por los cebadores. La estructura de un ciclo cerrado se puede representar de la siguiente manera:

Desnaturalización del ADN (fusión, desintegración de las lanzas de ADN) – 95°C – 1 o 2 hvilin;
cebadores caídos (los cebadores se unen a la plantilla de ADN, la temperatura de esta etapa está determinada por la composición de nucleótidos del cebador) - 60 ° C (por ejemplo) - 1 hvilina;
Elongación del ADN (la polimerasa sintetiza el ADN) - 72°C - 1 hora (dejar actuar una hora hasta que se sintetice el fragmento).

La base práctica para probar el método de reacción de la polimerasa de Lanziug en el laboratorio debe consistir en:

(o lo que también se llama termociclador);
sistemas para s (para visualización de resultados de PLR);
sistemas (para analizar los resultados del PLR);
(Para preparación de muestras);
conjunto (mecánico y electrónico).

Además del equipamiento principal y auxiliar para el pleno funcionamiento del laboratorio PLR, se cuenta con los materiales necesarios: puntas esterilizadas, tubos, gradillas para tubos y dispensadores.

La base de reactivos en el laboratorio PLR primario para llevar a cabo una reacción de polimerasa Lancug completa incluye la enzima ADN polimerasa con un tampón, cebadores (pequeños fragmentos de ADN sintéticos complementarios al núcleo y al final de la matriz de ADN analizada), suma de nucleótidos ( A, T, G, C). El agua purificada también es absolutamente necesaria.

Ventajas del método PLR

Alta sensibilidad de la investigación.

La sensibilidad del método es tal que se puede lograr la amplificación de PLR y la identificación de la secuencia diana en el caso de que ocurra una vez cada 5 células.

Especificidad del análisis.

PLR permite detectar el ADN de un agente infeccioso específico en presencia de ADN de otros microorganismos y ADN del organismo huésped, así como realizar un genotipado. Al seleccionar específicamente los componentes de la reacción (cebadores), puede detectar instantáneamente el ADN de los microorganismos relacionados.

La versatilidad del método PLR

A la derecha, para el diagnóstico PLR de enfermedades infecciosas y congestivas en humanos, puede utilizar el mismo conocimiento, seguir procedimientos universales para preparar muestras (muestras) y realizar análisis, así como el mismo conjunto y reactivos.

Ahorrando tiempo

Una ventaja importante del PLR es el número de etapas del trabajo microbiológico cultural. Preparación de muestras, realización de reacciones y análisis de resultados de máximo relieve y mucha automatización. En cualquier caso, los resultados pueden bajar rápidamente a 4-5 años.

Eficiencia del método PLR

Amplitud del material clínico estudiado.

Como resultado de la reacción de la polimerasa de Lanczyg, no solo se puede identificar material biológico de la enfermedad, sino también muchos otros sustratos en los que se pueden identificar moléculas de ADN con alta sensibilidad en hojas, por ejemplo, agua, suelo, productos alimenticios, microorganismos, y mucho más.

Todas las principales ventajas de este método único son la alta sensibilidad y especificidad, la identificación de agentes infecciosos y el genotipado de cualquier gen humano, la alta eficiencia y el ahorro de tiempo, y es universal. Tiene una base práctica: el método PLR actual puede usarse ampliamente en el diagnóstico clínico. la práctica médica, y la investigación y riqueza científica en otras áreas.

Zastosuvannya PLR

Las áreas de estancamiento de la reacción de la polimerasa de Lancug como resultado del método actual de biología molecular son variadas. Es rico en la variedad de material que se puede analizar (casi todo aquello en lo que se puede ver más claramente el ADN puede ser objeto de investigación), así como en los cebadores seleccionados. Las principales áreas de implementación del PLR:

medicina CLINICA

ecología

seguimiento del desarrollo de dovkilla
análisis de productos alimenticios
análisis de organismos genéticamente modificados (OGM)

medicina y medicina forense para barcos

Identificación individual
establecimiento de la patria

farmacología

medicina Veterinaria

investigación científica (biología molecular, genética)

Organización del laboratorio PLR

Información para la contratación

Nombre	Sobre nosotros	Virobnitstvo	Método	No gato.

PLR: diagnóstico de infecciones, un método inmediato y de alta precisión para detectar diversas enfermedades infecciosas. ¿Cuál es la diferencia entre otros análisis?

Esta abreviatura se descifra como reacción de la polimerasa de Lanzug. Según Wikipedia, Keri Mullis nació en 1983, historia de Estados Unidos. Por su contribución se le negó el Premio Nobel.

La última vez, el PLR salió victorioso únicamente utilizando el método científico, tras lo cual fue establecido con éxito por la medicina. La esencia de la investigación radica en el reconocimiento del agente infeccioso a partir del ADN y el ARN. La enfermedad de la piel, al penetrar en el ADN, cambia su estructura a diferentes tipos. Al ver el ADN alterado, el ayudante de laboratorio se da cuenta de cómo se producen las enfermedades en los humanos. Entre otras ventajas del PLR:

Identificación de la causa primaria de infección que ha perdido el “rastro” en el ADN. Cuando se identifican muchas enfermedades, es importante identificar aquellas donde empezó todo. Y para el correcto diagnóstico y selección de un tratamiento eficaz, la reacción de Lanzug es de enorme importancia;
Se instala en el PLR a medida que se cambia el ADN y en una etapa específica de transformación. Esto es necesario para excluir infecciones dudosas;
El diagnóstico PLR es sensible y detecta la presencia de bacterias y virus individuales. Los hedores pueden desaparecer en la sangre después de un baño prescrito incorrectamente o de una interrupción no planificada del baño. La cantidad mínima diagnosticada al decodificar el PLR es de 10 días cliente. Otros métodos de prueba son más pequeños;
Los microorganismos patógenos se detectan según la manifestación de los síntomas del PPSS. La enfermedad detectada en una etapa temprana no dura tanto como la forma avanzada;
Se tendrán en cuenta los resultados del PLR de enfermedades para rematarlo rápidamente. Se necesitan un poco más de 4 a 6 años para diagnosticar las infecciones. Junto con el descifrado, todo el proceso lleva un poco más de 1 a 2 días;
De una vez, se extrae el material de ADN para realizar 5-6 pruebas. Una persona enferma no tendrá la oportunidad de someterse a frotis muchas veces;
El PLR y el seguimiento de infecciones no se detienen, esta área está en constante desarrollo. Con el descubrimiento de nuevos sistemas de prueba con mayor sensibilidad, disminuye la probabilidad de realizar un seguimiento. Como antes sólo estaba disponible para los residentes de las megaciudades, ahora los médicos de los hospitales de las regiones no pueden imaginarse el tratamiento de enfermedades sin él.

Características del método PLR:

Precisión (las correcciones son mínimas y su frecuencia no supera el 0,01%);
Sensibilidad (la prueba "cuenta" bacterias individuales en la sangre y en frotis);
Especificidad (PLR detecta infecciones que a menudo no se manifiestan hasta una etapa importante);
Unicidad (análisis de resultados en situaciones en las que otras investigaciones no revelan nada).

Resultados del análisis PLR

¿Cómo funciona el método de reacción de Lanzug y cómo se prepara antes del análisis?

La reacción de Lanzug en cerebros de laboratorio transmite la multiplicación de muestras ricas de ADN y ARN identificando la misma parte dañada. Los ácidos se amplifican (conjugan) con la ayuda de preparaciones enzimáticas. Utilizando enzimas vicorísticas, el asistente de laboratorio extrae copias suficientes del fragmento de ADN patógeno para alinear el PLR de los síntomas de estas y otras enfermedades provocadas por una infección.

Como regla general, se analizan materiales biológicos tomados mediante muestreo o frotis. Para la identificación (descifrando las infecciones de transmisión sexual), se toma un frotis de la epidermis, el cuello uterino o el útero para PLR. A veces los vikoristas también pelean.

Para confirmar o detectar la presencia de hepatitis, toxoplasmosis o VIH, se extrae sangre de una vena. La sangre extraída del dedo a menudo da resultados negativos para la leche. La mononucleosis se diagnostica después de recolectar material de garganta de mula. La tuberculosis se puede detectar después de la recolección de esputo, como se ve claramente en pacientes con heridas.

Un frotis del útero y el cuello uterino para PLR es un análisis simple, no se puede perder el tiempo. 2-3 días antes del evento, debes prepararte para una vida majestuosa. Hoy en día, los geles y leches de origen natural se utilizan para una higiene especial. Puedes beber agua tibia del grifo. Deje de lavarse la noche antes de llevar la herida al laboratorio o al consultorio del médico.

También es importante el tratamiento de la candidiasis con la ayuda de cremas, ungüentos, supositorios y aerosoles, que se lleva a cabo. Se toma un frotis en la primera pelvis después o inmediatamente después de la menstruación. Para obtener resultados precisos, se recomienda no ir al baño durante 2 o 3 años antes de realizar un frotis PLR.

En las personas que tienen una reacción de Lanziug, se toma un hisopo de la uretra. El material biológico se recoge mediante una sonda estéril o un hisopo de algodón, que se introduce en la semilla. Durante la hora que dura el procedimiento, es posible que sienta una ligera molestia o hinchazón del hígado. La gente también tiene que dedicar mucho tiempo a aprender sobre sexo e higiene. El período previo al análisis, se prescribe tratamiento con antibióticos y otros medicamentos. Si las molestias persisten tras la recogida, se recomienda acudir a la clínica lo antes posible.

Es aceptable que el paciente se someta a análisis de sangre o a un frotis de sus órganos. El material genético se coloca en un dispositivo de amplificación PLR y allí se añaden enzimas. El ADN se calienta a 90-95 ° C hasta que el cordón se convierte en una brocheta. Este proceso se llama desnaturalización. Durante una hora de funcionamiento del reactor, a partir de una muestra de ADN y ARN, se crean miles de copias para su análisis (descifrando la reacción).

Resultados del diagnóstico de PLR.

La reacción de Lanzug muestra la gravedad de la infección y precisamente el número de complicaciones evidentes. El desmoronamiento de las rocas restantes es la introducción individual de genes de mutación en el ADN humano para revelar la capacidad de cambiar el genotipo.

¿Qué revela el diagnóstico de infección por PPR?

La decodificación de los resultados del análisis es claramente visible para un médico cualificado. El poder de la reacción de Lanczyg nos permite confirmar o detectar la presencia de tales enfermedades:

Como se desprende claramente de esta lista, los diagnósticos PLR brindan a los médicos una amplia variedad de especialidades altamente especializadas sin capacidades limitadas. El método se puede utilizar en neumología, virología, enfermedades infecciosas, oncología, gastroenterología, hematología, ginecología y urología.

Descifrado PLR: resultados

Los médicos evalúan los análisis de la reacción de Lancug individualmente para un paciente de piel con patologías obvias y enfermedades crónicas. Los resultados de los análisis PLR indican, como se mencionó anteriormente, las características específicas de las bacterias patógenas. Al tratar con ellos, el médico establece la gravedad y el estadio de la enfermedad. Sobre la base de estos indicadores, se indican además la dosificación de los medicamentos y la duración del tratamiento.

Un resultado PLR negativo significa que el material biológico recolectado presenta virus o infecciones todos los días. El PLR positivo es una señal antes de la alarma. Además, se detectó una infección en la sangre y otras áreas biológicas del paciente.

Si los valores son mínimos, podemos hablar de la simple presencia de una enfermedad, y no sólo del desarrollo activo de la enfermedad. Un simple portador de la infección, que sólo se manifiesta en la PPR, pero no muestra los demás síntomas habituales, debe ser consultado constantemente por un médico.

Es importante no entrar en pánico y recordar que la mayoría de los virus conocidos por la ciencia pueden tratarse con medicamentos antibacterianos. Seleccionarlos y sustituirlos por otros en caso de ineficacia puede privar de la cualificación del médico, como lo demuestra el tratamiento de ésta y otras enfermedades.

El descifrado del PLR se puede realizar no sólo a discreción del médico, sino también a discreción de las autoridades. A menudo tenemos miedo de las mujeres que planean quedar embarazadas en un futuro próximo para evitar la posibilidad de contraer enfermedades de transmisión sexual. Cuando se coloca en la consulta regional con el paciente, no es necesario realizar un diagnóstico exhaustivo.

La PLR se prescribe para mujeres obligatorias que han tenido un pequeño número de abortos o que han tenido abortos por diversas razones. Antes de la EBC se realiza un análisis para identificar todas las causas de la posible expulsión del óvulo fecundado.

La gente suele realizar PLR después del lanzamiento, durante la hora de algún tipo de romance festivo o boda. El diagnóstico les ayuda a no poner en peligro sus vidas y la salud de sus posibles parejas sexuales.

A menudo, la PLR es la única posibilidad que tiene un paciente de recuperarse de una enfermedad en la etapa embrionaria, si el riesgo innecesario se complica con un viaje difícil.

Un frotis utilizando el método PLR para diagnosticar enfermedades infecciosas puede volverse más importante:

Diagnóstico directo de enfermedades y dolencias infecciosas.

Muchos métodos tradicionales de diagnóstico de laboratorio se basan en la detección de enfermedades cotidianas mediante diversos signos indirectos. Por ejemplo, el diagnóstico ELISA se basa en proteínas detectadas en la sangre del paciente, que son producto de la descomposición de agentes infecciosos, a partir de las cuales el médico puede hacer otro diagnóstico. El método de análisis PLR proporciona una indicación directa de la presencia de una muestra de ADN específica de la enfermedad en el material extraído del paciente.

Alta especificidad del diagnóstico PLR.

Durante el proceso de análisis, el material examinado revela un fragmento de ADN que es específico y tiene poder para un organismo en particular, ya sea una bacteria o un virus. Este fragmento de ADN es único y no típico de una infección animal en la Tierra.

Alta sensibilidad de PLR.

Pueden ocurrir infecciones si el material extraído del paciente contiene menos de una célula de bacteria o virus. Comparable con otros métodos de diagnóstico inmunológico y microbiológico: sensibilidad del análisis PLR – 10-100 células por muestra, otros métodos – 103-105 células.

0Matriz (=> Análisis) Matriz (=> 2) Matriz (=>.html) 2

La versatilidad del análisis PLR.

Para la investigación de PLR se puede utilizar prácticamente cualquier material que no esté disponible para la investigación por otros métodos: mocos, cortes, sangre, suero, esputo, eyaculación, raspados de células epiteliales, fragmentos, etc. La infección puede ocurrir en cualquier organismo biológico. materiales y tejidos.

Existe un alto grado de apoyo a los resultados del análisis PLR.

Un método uniforme para todo el procesamiento del material extraído de un paciente para análisis, detección de productos de reacción y amplificación PLR automatizada permite un nuevo diagnóstico PLR en 4-5 años. Al mismo tiempo, se dedica mucho más de una hora a los métodos de observación cultural, desde muchos días hasta muchos días, ya que es necesario ver y luego desarrollar el patógeno en el cultivo celular.

Posibilidad de diagnosticar cualquier tipo de infección.

La alta sensibilidad del método PLR permite diagnosticar infecciones no solo en la etapa aguda de la enfermedad, sino también detectar infecciones crónicas e identificar bacterias y virus individuales.

Un frotis mediante el método PLR permite detectar infecciones que no se pueden detectar con un frotis de flora: clamidia, ureaplasmosis, micoplasmosis, herpes genital.

¿Cuáles son las ventajas significativas del método de investigación y del diagnóstico PLR? Las desventajas del diagnóstico PLR incluyen:

Posibilidad de obtener un resultado positivo.

El análisis PLR puede mostrar un resultado positivo si la infección ya está muerta, "muerta" por los antibióticos y las células muertas todavía se encuentran en los tejidos del paciente. ¿Cómo es eso posible? Muy simple. Por ejemplo, la infección vive en los tejidos del epitelio (en la membrana mucosa de los órganos o de los ojos). Ambos lo disfrutaron. Se necesita una hora para "renovar" el epitelio de las células. Si el médico retira el material antes de que las células se renueven por completo, el material puede contener células muertas de infección. Klitini, obviamente, elimina material genético: ADN o ARN del cuerpo, que es lo que piensa el PLR. El PLR no separa las células muertas de las vivas: busca ADN y las “clona” en grandes cantidades. El resultado de tal análisis es positivo. De hecho, es cierto que somos hibnopositivos.

La incapacidad de la PLR para “recuperar” una infección muerta de una viva dificulta su detección y el control de la eficacia del tratamiento. La regla principal, por supuesto, es garantizar que los excesos de infección muertos se eliminen completamente del cuerpo, lo que una persona promedio sobrevive durante 4 a 8 años. Por lo tanto, después de tomar las pastillas de antibióticos restantes, el método PLR puede y debe utilizarse para controlar la eficacia del tratamiento.

gastroenterología complejo de diagnóstico - 5360 rublos

Ahorro en TILKI EN BEREZNY - 15%

1000 rublos Recuperar el ECG de la decodificación

- 25%primario
ver un doctor
terapeuta los fines de semana

980 rublos. primera cita con un hirudoterapeuta

cita con un terapeuta - 1130 rublos (alternativamente 1500 rublos) "Sólo entre semana, los sábados y las semanas, consultar a un terapeuta con un descuento del 25%: 1.130 rublos, en lugar de 1.500 rublos (los procedimientos de diagnóstico se pagan según la lista de precios)

En una etapa posterior, el control de la prohibición se puede realizar mediante un método cultural diferente, o mediante la siembra: sólo los microorganismos vivos que se reproducen pueden servir como signo de no violencia.

No es aconsejable utilizar el análisis PLR para diagnosticar la gardnerelosis, ya que los gardnerelli, quienes padecen esta enfermedad, en un pequeño número de casos, normalmente viven en el suelo. El ADN de estas bacterias con PLR vicorístico pronto se perderá. Gardnerella no aparece en un frotis y la bacterioscopia en este caso es un método suficiente para diagnosticar gardnerelosis y controlar el tratamiento.
Variedad de microorganismos

Cualquier microbio puede cambiar, y al mismo tiempo que el ADN. El trasero más bonito de este galus es el virus de la gripe. Después de haber estado enferma una vez, una persona desarrolla anticuerpos contra el virus. En teoría, si nos enfermamos de gripe aunque sea una sola vez, al igual que con la gripe, no es culpa nuestra volver a enfermarnos. Casi nos duele la garganta. ¿Cuál es la razón? El virus “muta”, “cambia” ligeramente su genoma, y nuestro sistema inmunológico, nuestros anticuerpos ya no “reconocen” al viejo huésped con una nueva apariencia. No es una locura que me esté enfermando de gripe otra vez...

Al diseñar un amplificador (sistema de prueba PLR), se selecciona un fragmento de ADN específico de un microorganismo determinado que sea menos susceptible a cambios. Se "selecciona" de la llamada sección altamente conservadora del ADN. Alternativamente, la abundancia de microorganismos puede llevar al hecho de que ciertos genotipos o cepas del organismo estudiado puedan causar mutaciones en el genoma que se amplifican (clones) y, por lo tanto, no quedan atrapados en el sistema de prueba.

Por tanto, los diferentes sistemas de prueba son una de las razones por las que los análisis realizados en diferentes laboratorios y en diferentes clínicas utilizando el mismo método PLR pueden mostrar resultados diametralmente diferentes. Para evitar mutaciones en la medida de lo posible, ahora se han desarrollado estándares para regular las pruebas (incluida la verificación de reacciones cruzadas, así como las pruebas de cepas aisladas de la enfermedad que están indicadas), lo que requiere que el sistema de pruebas vaya primero al ¿Se utilizará Vicistan para diagnosticar su salud? ¿Por qué las buenas clínicas y laboratorios utilizan Vicistan para las generaciones restantes de sistemas de pruebas? Y nuestro centro médico "Euromedprestige" es uno de los pocos que puede ofrecer a sus clientes un diagnóstico claro.