Golovna Simptomat Si të kryhet një analizë diagnostikuese PCR duke përdorur metodën PCR. Ndjeshmëri e lartë e hetimit

Si të kryhet një analizë diagnostikuese PCR duke përdorur metodën PCR. Ndjeshmëri e lartë e hetimit

PLR (reaksioni i polimerazës Lanzug) është një arritje e biologjisë molekulare, një nga metodat kryesore të diagnostikimit klinik laboratorik në fund të shekullit të 20-të dhe fillimit të shekullit të 21-të, e cila sjell dëme të mëdha për pacientë të ndryshëm të shkencës mjekësore.

Në një mënyrë të tillë, pasi në mes të miliona qelizave të trupit të njeriut, nuk është vetë virusi i gjallë që shkatërrohet, por vetëm një pjesë e ADN-së së tij, atëherë PLR, pasi nuk mund të shqetësohet, mund të përpiqet. për të shmangur detyrën dhe për të informuar për praninë e "të huajit" "një rezultat pozitiv. Thelbi i PLR është avantazhi i tij kryesor.

Hidratimi dhe mangësitë

Një laborator që kryen diagnostikimin PLR ka një nevojë të madhe për disponueshmërinë e sistemeve të testimit dhe kualifikimet e personelit mjekësor. Ky është një laborator i teknologjisë së lartë që ka një arsenal të mirëorganizuar reagentësh shumë të ndjeshëm dhe shumë specifikë, kështu që nuk ka mungesa të veçanta. Çdo gjë që tregon një rezultat pozitiv në mungesë të manifestimeve klinike dhe kështu e vendos mjekun para një dileme: duhet të fillojmë trajtimin apo jo?

Mjeku që kujdeset për pacientin fillon të dyshojë në besueshmërinë e rezultateve të analizës, për sa kohë që nuk ka shenja të sëmundjes. Sidoqoftë, ndjeshmëria e lartë e sistemit PLR bazohet në kujtesën që zbulon një thirrje zgjimi në fazën paraklinike, dhe një rezultat pozitiv në këtë rast është më shpejt se një vit, jo me një goditje të gjatë. Bazuar në këtë, mjeku është përgjegjës për marrjen e vendimeve të tij për dobinë e terapisë, duke marrë parasysh argumentet e tjera "pro" dhe "kundër".

Përparësitë e diagnostikimit duke përdorur reaksionin e polimerazës Lanziug janë të dukshme:

Specifikimi i lartë, e cila arrin 100%, është për shkak të pranisë në kampion të grimcave të acideve nukleike që janë të fuqishme në një organizëm të caktuar, ose të huaja për njerëzit;
Produktivitet i lartë, dhe madje PLR është një teknikë e automatizuar e teknologjisë së lartë që bën të mundur kryerjen e testimit në ditën e mbledhjes së materialit dhe trajtimin rutinë të pacientit në rast të ndonjë ankthi;
PLR, duke punuar në një avari, mund të kryejë një sërë hetimesh rreth zbuloni një numër pushimesh sikur ajo të ishte një thesar i tillë. Për shembull, kur diagnostikohet infeksioni klamidial, kur PLR aplikohet në metodat kryesore, për të diagnostikuar klamidia, mund të zbulohet Neisser (gonokok) - një alarmist. Për më tepër, nuk ka asnjë ndikim negativ në besueshmërinë e rezultateve;
Testimi duke përdorur metodën PLR zbulon mikroorganizma të pasigurt gjatë periudhës së inkubacionit Nëse sëmundja nuk ka arritur ende në fund të trupit, atëherë diagnoza e hershme parashikon zhvillimin e ardhshëm të procesit patologjik, gjë që bën të mundur përgatitjen për diçka të re dhe pranimin e saj nga e tëra.

Për më tepër, për të eliminuar konfuzionin që ndonjëherë lind gjatë diagnostikimit, PLR mbrohet me faktin se rezultatet e tij mund të regjistrohen (foto, kompjuter) duke përdorur metodën e vikorizimit të tyre tek ekspertët për qëllime që mund të jenë të nevojshme.

Norma në llojet PLR është të vlerësohen rezultatet negative, që tregon praninë e fragmenteve të acideve nukleike të huaja, një dëshmi pozitive tregon praninë e infeksionit në trup, vlerat dixhitale tregojnë forcën e virusit dhe përqendrimin e tij në momentin e testimit. Proteo deshifroi nga jashtë analizën e këtij mjeku, i cili ka bërë një studim të veçantë me temën “PLR”. Nuk ka kuptim të përpiqeni të interpretoni vetë rezultatet, pasi mundeni, sapo të ndodhë gjithçka, të keqkuptoni dhe të filloni të mburreni.

Nga se ka frikë PLR, çfarë mund të bëjë dhe si mund të përgatitemi për të?

Si çdo hetim tjetër, Ndonjëherë rezultatet e testit janë pozitive ose negative, de PLR nuk është fajtor. Në situata të tilla mund të ndodhin sa vijon:

Ndërprerja e procesit teknologjik në një nga fazat e reagimit;
Rregullat e Nedotrimannya për mbledhjen e materialit, ruajtjen dhe transportin e tij;
Prania e elementeve të palëve të treta në material.

Kjo do të thotë, përpara PLR - diagnostikimit të infeksioneve, është e nevojshme t'i qaseni me respekt, me kujdes dhe saktësi, përndryshe materiali mund të ndryshojë strukturën e tij ose të shembet plotësisht.

Fazat e diagnostikimit të PLR. Rezultatet e Milkovit mund të prishen në çdo fazë të hetimit.

Diagnostifikimi PLR i infeksioneve bie në kategorinë e "standardeve të arta" midis metodave të tjera laboratorike, kështu që ato mund të përdoren për të zbuluar sëmundjet e përditshme të të pasurve, të cilat në shikim të parë nuk sugjerojnë asgjë domethënëse. si unë:

Tuberkulozi i lokalizimeve të ndryshme, pneumonia (përfshirë pneumoninë atipike të shkaktuar nga klamidia);
Infeksionet e fëmijërisë (rubeola e lopës, shytat, cicërima);
Difteria;
Salmonella;
Sëmundja infektive zoonotike - listerioza (sëmundja karakterizohet nga një sërë simptomash për shkak të dëmtimit të nyjeve limfatike, sistemit nervor qendror, organeve të brendshme);
Sëmundja e shkaktuar nga virusi Epstein-Barr (mononukleoza infektive, etj.);
Patologji onkologjike, e provokuar nga infeksioni papilomavirus (PZHB i këtij lloji);
Boreliosis (sëmundja Lyme, encefaliti i lindur nga rriqrat);
Infeksioni Helicobacter pylori, i shkaktuar nga mikrobi Helicobacter pylori, i cili jeton në vulvën e një personi. Është vërtetuar se Helicobacter pylori shkakton zhvillimin e kancerit të skutumit ose zorrës së trashë 12-shifrore;
dhe praktikisht gjithçka.

PLR-diagnoza e infeksioneve që transmetohen nga shteti është veçanërisht e rëndësishme kur fragmentet e sëmundjes, duke bërtitur në këtë mënyrë, shpesh kalojnë një orë të vështirë pa asnjë manifestim klinik, pastaj, kur fillon ashpërsia, fillon aktiviteti. , në një mënyrë të tillë, kërcënojnë shëndetin dhe shkatërrojnë jetën e fëmijës. Përdorni i në të njëjtën mënyrë. Veprimet prej tyre ("pishtari") vendosen menjëherë dhe deri në ІПШ, atëherë pjesa tjetër kërkojnë shqyrtimin e raportit. Mund të mësoni më shumë rreth metodave më të njohura në seksionet vijuese të artikullit.

Si të përgatiteni saktë për të marrë një rezultat të besueshëm?

Është e rëndësishme të theksohet se përgatitja për PLR është e thjeshtë dhe nuk përfshin ndonjë përpjekje të veçantë nga ana e pacientit. Është e nevojshme të nënshkruani tre detyra të vështira:

Mos e kontaktoni artikullin 24 vjet përpara datës së analizës;
Për të mbledhur dhe analizuar gjakun nga një venë, duhet të vini në varkën e agjërimit, por nuk mund të pini derisa të flisni;
Ma jepni sa më shpejt (në një kavanoz steril, vendoseni para farmacisë).

PLR mund të kryhet në çdo mjedis biologjik

Metoda PLR nuk ndërhyn me "eturinë për gjak"; ajo përdor një medium biologjik për të parandaluar transmetimin e agjentëve infektivë. zgjidhni - ajo që duhet të merret për hetime të mëtejshme do t'i dërgohet mjekut.

Në këtë mënyrë, në kërkim të alarmit, përveç analizës së gjakut (edhe pse mund të afrohemi dhe në shumicën e rasteve të vazhdojmë paralelisht me materialet e tjera), mund të vikorizoni:

(Vizioni i traktit urogjenital);
Një copëz mukoze të gojës, konjuktivës, nazofaringit dhe arterieve (për gratë, merrni nga qafa e mitrës dhe muskulatura, për burrat, nga uretra);
Slinu;
Sperma;
nga hardhia e përparme;
Indi placental dhe lëngu amniotik (lëngu amniotik);
Sedimentimi (pas centrifugimit), për shembull, për të identifikuar llojet e IPSS dhe mycobacterium tuberculosis;
Sputum dhe lëng pleural me të njëjtën substancë;
eksudati;
Palca kurrizore nëse ekziston dyshimi për një lezion infektiv të sistemit nervor qendror;
Materiali i biopsisë (bioptat), i marrë nga mëlçia, zorra me 12 kthetra, scute etj.

Përpara sa më sipër, dua të shtoj se materiali për testim në të gjitha rastet, në gërvishtjet dhe në vëzhgimet, do të jetë i mjaftueshëm, disa testime me metodën PLR nuk kërkojnë shumë përpjekje, analiza është e kufizuar në shumë Mikrolitrat duhet të merren nga një mikrotub i tipit ependorf dhe të dërgohen në Vivchennia.

Sëmundje dhe stagnim PLR

Reaksioni VIL dhe polimeraza Lanzug

Nëse i nënshtroheni testimit anonim dhe keni rezultate pozitive, diagnostikimi i imunobllotit duhet të përsëritet përsëri. Pasi të konfirmohet diagnoza, pacientit i përshkruhen ekzaminime shtesë:

Bazuar në reaksionet imunologjike shtesë të vlerave absolute të numrit të limfociteve CD 4 (qelizat imunokompetente - T-ndihmësit ose qelizat e veshkave), cili infeksion na godet fillimisht, pas së cilës ato konsumohen, autoritetet e tyre kryesore nuk mund të shkatërrojnë "të tyren". "dhe e dikujt tjetër." Virusi ARN që qarkullon në plazmën e gjakut ngatërrohet me qelizat normale në trup dhe nuk reagon ndaj tyre;
Zbulimi i virusit ARN me metodën PLR dhe shpërndarja e përqendrimit të grimcave virale në bazë të fazës, ashpërsisë së procesit patologjik dhe prognozës bazuar në bilancin e këtyre të dhënave. Natyrisht, fjala "normë" mungon në plan, kështu që reagimi është gjithmonë pozitiv, dhe deshifrimi i vlerave dixhitale bie në kompetencën e mjekut.

PLR dhe hepatiti

Metoda PLR mund të zbulojë hepatitin, më shpesh testi përdoret për të diagnostikuar hepatitin, i cili diagnostikohet dobët me metoda të tjera.

Virusi i hepatitit C (ARN) është përgjegjës për sjelljen e tij në trupin e njeriut. I zhytur në gjenomin e qelizave të mëlçisë (hepatocitet), ai qëndron atje në kohën e duhur, e cila mund të vijë në 2 ose 20 vjet, kështu që mjekët e quajtën atë "vrasësi i vdekur". Hepatiti C çon në zhvillimin e një procesi malinj në parenkimën e mëlçisë, i cili manifestohet në fazat e mëvonshme. Sistemi imunitar nuk i shënon të gjitha këto, duke ngatërruar virusin me një hepatocit. Megjithatë, antitrupat ndaj virusit gjenerohen në shumë raste dhe ato nuk mbrojnë sistemin imunitar. Për diagnostikimin e ELISA për hepatitin C, nuk është shumë informative, pasi tregon se virusi ka humbur gjurmët dhe nëse ai vetë është i infektuar nuk dihet. Në rastet e infektimit me HCV, ndodh vetë-zhdukja, pasi antitrupat kundër virusit humbasin dhe vazhdojnë të qarkullojnë përgjithmonë (kujtesa imunologjike). PLR i paraprin dukshëm krijimit të antitrupave dhe mund të zbulojë një grimcë virale që në 1-1,5 ditë, ndërsa AT mund të shfaqet në intervale prej 2 muajsh para lindjes.

Diagnostifikimi i PLR në rastet kur virusi i hepatitit C dyshohet se përhapet në trupin e njeriut është metoda më optimale e hetimit, pasi është e mundur të njihet vetëm prania e një "armiku ligjor" në gjakun ose biopsinë e mëlçisë së një pacienti. .

Sidoqoftë, ndonjëherë mund të ketë një konvulsion nëse AT është pozitiv dhe rezultati i PLR është negativ. Kjo metodë përdoret kur virusi është me intensitet shumë të ulët ose kur ai hyn në mëlçi pa hyrë në gjak. Për të ditur të vërtetën, pacientit i merret një analizë e përsëritur, ose edhe më shumë se një.

Infeksioni i papilomavirusit

Meqenëse vetë-infeksioni nuk mund të ndodhë, është gjithashtu e mundur, pa treguar asgjë në vetvete, të vazhdojë për një kohë të gjatë në trupin e sundimtarit, për të cilin nuk dyshoj për çmimin, pasi fragmentet PLR nuk janë zhvilluar, dhe simptomat e sëmundjes ishin të përditshme. Megjithatë, prania e infeksionit papillomavirus, qoftë latent apo latent, nuk është aspak e mirë për shëndetin e një personi dhe është veçanërisht e rrezikshme të mbartet lloji i virusit që shkakton kancer (llojet 16, 18).

Më shpesh, gjysma e popullsisë vuan nga PZHBV, pasi virusi ka më shumë gjasa të prekë pjesën femërore të trupit, dhe veçanërisht qafën e mitrës, ku lloje të ndryshme virusesh shkaktojnë zhvillimin e proceseve displazike, dhe më pas kancerin e qafës së mitrës, siç ndodh. mos e falni displazinë dhe nuk i jepni dorë të lirë virusit. Pra, boshti, reagimi i polimerazës Lanzug zbulon ADN-në virale, dhe më pas ose lloji "i keq" ose "i mirë" (onkogjenik ose joonkogjen) vendoset në trupin e gruas.

Infeksione të tjera IPSS dhe TORCH

Natyrisht, reaksioni i polimerazës Lanczug mund të zbulojë çdo strukturë të huaj që formohet nga acidet nukleike, gjë që e bën testin të përshtatshëm për identifikimin e të gjitha infeksioneve SPS dhe TORCH, të cilat nuk zbulohen gjithmonë. A është e mundur të kryhen hetime kaq të shtrenjta për të identifikuar gonokokun, të cilët janë të disponueshëm dhe më të lirë?

Infeksionet TORCH dhe IPSS janë të ndërlidhura, prandaj është e rëndësishme të përcaktohet se cili grup duhet t'i caktohet njëri-tjetrit. Mund të jetë e vështirë për ta të rriten, pasi nuk do të ekspozohen ndaj grupeve të ndryshme të mikroorganizmave, të cilët mund të transmetohen nga shteti, qoftë vetëm për mendjet e reja (imunodefiçencë), ose mund të bëhen më pak interesante për rëndësinë e një të mundshme. fluks negativ gjatë shtatzënisë dhe shtatzënisë.

PLR është metoda kryesore për zbulimin e infeksioneve të fituara

Zhvillimi i manifestimeve klinike bazohet në faktorë të ndryshëm, të cilët përcaktohen nga fuqia e vetëm PLR, të cilat janë detyrat kryesore, si me ELISA ashtu edhe me si një test i vetëm konfirmues, veçanërisht për simptomat e sëmundjes. Një situatë kaq e vështirë mund të shkaktohet nga një infeksion polimikrobik, i cili përveç sëmundjeve të dukshme përfshin edhe patogjenë mendorë.

Ureaplazma vërehet më shpesh në çiftet me mikoplazmë. Nuk është për asgjë. Këto specie, si klamidia, nuk janë as viruse dhe as baktere, ato jetojnë në mes të qelizave dhe mund të shoqërohen me IPSS, megjithëse prania e tyre në një trup të shëndetshëm nuk është gjithashtu e pazakontë. Pra, për të hequr një hundë të shëndetshme nga një person i sëmurë, kërkohen metoda të veçanta dhe PLR konsiderohet më e besueshme, duke marrë parasysh veçoritë e sjelljes së këtyre mikroorganizmave etj. dhe hetimet rezultojnë të paefektshme.

Çfarë është çështja (lloji 1, 2) dhe që lidhet gjithashtu me herpesvirusin (tipi 5), atëherë situata këtu është e paqartë. Shkalla e infektimit të popullsisë së tokës po i afrohet 100%, kështu që në këtë periudhë është shumë e rëndësishme të identifikohet virusi dhe doza e tij, e cila luan një rol veçanërisht në virulencë, madje edhe tek të rriturit, virusi jeton në trupin e tij, ai. shpesh nuk i dorëzohet etjes dhe nuk jep shenjë sëmundjeje.

Prandaj, nuk duhet të injoroni recetën e mjekut për një reagim të tillë, madje në disa raste, reaksioni i polimerazës Lanzug është një metodë e detyrueshme dhe e nevojshme e diagnostikimit laboratorik, e cila mund të mbrojë jo vetëm nga komplikimet serioze. sikur të mos kishte lindur ende.

Ne dëshirojmë të kuptojmë se një metodë kaq e mrekullueshme si PLR i ka shërbyer njerëzimit për më shumë se 30 vjet. Gjatë kryerjes së këtij testi, nuk duhet kufizuar nga rreziku i sëmundjeve infektive. Reaksioni i polimerazës Lanzug, i popullarizuar në fushën e biologjisë molekulare, është i lidhur pazgjidhshmërisht me gjenetikën. kontakton me sukses një hetues penal për të identifikuar një person të caktuar, në mjekësinë e anijeve për ngritjen e mjekësisë veterinare, në mjekësinë veterinare, si një klinikë për kafshët mund të blejnë prona në rrugë, si dhe në zona të tjera (industri, qeverisje rurale, etj.).

Video: PLR - thelbi i atij stagnimi

Gjenetika e baktereve Informacion për një aktivitet tjetër.

Reaksioni i polimerazës Lanzug

Reaksioni i polimerazës Lanczug është një metodë që lejon një rritje të madhe (përforcim) të një numri molekulash të ADN-së në kampionin që analizohet (përfshirë materialin biologjik ose kulturën e pastër).

Përparësitë kryesore të PLR-së si një metodë diagnostike në mikrobiologji janë ndjeshmëria e saj shumë e lartë, e cila lejon zbulimin e përqendrimeve jashtëzakonisht të ulëta të patogjenëve në mostra, si dhe specifikën e rregulluar, e cila lejon zbulimin e ose të Identifikimit të krijesave në mënyrë gjenerike. , specie ose nivel nënspecifik. Pjesa kryesore e PLR është për shkak të ndjeshmërisë së saj të lartë - mostrat mund të kontaminojnë lehtësisht ADN-në nga kontrolli pozitiv, ose produkti PLR, i cili do të çojë në një reagim negativ-pozitiv. Kjo imponon kufizime të rënda në mendjet në të cilat kryhet përzierja e PLR dhe puna me produktet e përfunduara PLR.

Kryer PLR. Një përzierje reagimi po përgatitet për të kombinuar përbërësit e mëposhtëm:

Pashë ADN-në nga ekzemplari i gjurmuar,

Buferny Rozchin

jonet Mg2+ (të nevojshme për enzimën),

Dy abetare janë molekula të shkurtra të ADN-së me një fije floku (më shpesh 18 deri në 24 nukleotide të gjata), plotësuese me skajet e sekuencave të ndryshme të ADN-së që zbulohen.

Sumish trifosfate deoksinukleotide.

Polimeraza e ADN-së rezistente ndaj nxehtësisë (më shpesh e vikorizuar Taq polimeraza - polimeraza që shihet në Termus aquaticus).

Më pas ky reaksion mund të vendoset në një përforcues, i cili në fakt programohet nga një termostat. Në amplifikator kryhen 30-40 cikle ndryshimesh të temperaturës. Lëkura nga këto cikle përbëhet nga tre faza (ndarja Fig. 1):

Denatyrimi (temperatura 94°W) - shtizat e ujit shpërthejnë dhe heshtat e ADN-së ndryshojnë.

Primerët kanë rënë (temperatura është rreth 50-60°C) - abetaret shtohen në skajet e sekuencave të ADN-së. Ndërkohë, në temperatura të ulëta, ngritja e vargjeve të ADN-së dalëse nga fragmenti i gjurmuar (rinaturimi) është energjikisht më i favorshëm, për shkak të përqendrimit të abetareve në përzierjen e reaksionit me shumë shkallë të madhësisë. Varësisht nga përqendrimi i ADN-së në sekuenca (për shembull, në ciklet e kallirit të PLR), reagimi i abetareve vazhdon me një ulje të ADN-së. Temperatura e shkrirjes zgjidhet në bazë të temperaturës së shkrirjes (denaturimit) të primerëve.

Zgjatja (temperatura është 72 °C) - ADN polimeraza prodhon abetare të matricës së gjatë të ADN-së. Temperatura tregon temperaturën optimale për prodhimin e polimerazës së ADN-së të vikorizuar.

Zbulimi i rezultateve ndryshon në versione të ndryshme të PLR dhe përshkruhet në seksionin "Llojet e PLR".

Dinamika e PLR

Në ciklet e hershme PLR, një numër i molekulave të dyfishta të ADN-së, madhësia e të cilave përcaktohet nga pozicioni midis vendeve të uljes së primerit, ndërveprojnë me ciklin e lëkurës. Në këtë mënyrë krijohet një numër i vogël i molekulave ekzistuese të ADN-së që mund të nxirren (div. Fig. 2).

Kështu, në ciklet e hershme, forca e produktit PLR përshkruhet me formulën m*2 n, ku m është rendimenti i ADN-së së mostrës, n është numri i cikleve. Pastaj reagimi arrin një pllajë. Kjo ndodh nëpërmjet akumulimit të produktit të reaksionit, uljes së përqendrimit të primerëve dhe trifosfateve deoksinukleotide, si dhe rritjes së përqendrimit të pirofosfatit (Fig. 3).

Riznovidi PLR

Konventa PLR

Në këtë version të reaksionit PLR, më pas zgjidhet numri i cikleve (30-40), pas së cilës analizohet nëse akumulimi i molekulave të ADN-së vullkanike është grumbulluar në përzierjen e reaksionit.

Ky opsion për vendosjen e PLR në rastin e venave me variçe si metodë diagnostike është një metodë e qartë. Një reagim pozitiv tregon praninë e gjurmëve të molekulave të ADN-së që gjenden në imazh. Reagim negativ për të informuar për ekzistencën e tij. Një vlerësim sasior i molekulave të ADN-së dalëse është i pamundur përmes përgjigjes ndaj një pllaje.

Metoda kryesore e identifikimit të produktit është elektroforeza në xhel agarozë ose poliakrilamide. Produktet PLR ndahen në një xhel nën një fushë elektrike për të zvogëluar peshën e tyre molekulare. Xhel përmban barberry ndërthurëse (fluoreshente në gjendjen e lidhur me ADN-në - më së shpeshti bromid ethid). Kështu, kur ekspozohet ndaj dritës ultravjollcë, do të jetë e mundur të zbulohet prania ose prania e një shenje që tregon ADN-në e masës molekulare të kërkuar. Gjatë orës së kryerjes së PLR-së për qëllime diagnostike, vendoset gjithmonë kontrolli pozitiv dhe negativ i reaksionit, i cili rezulton me të njëjtat shenja (div. Fig. 4).

PLR në kohë reale

Në këtë version të prodhimit PLR, forca e produktit PLR në përzierjen e reaksionit regjistrohet vazhdimisht gjatë rrjedhës së reagimit. Kjo bën të mundur gjenerimin e një kurbë reaksioni (div. Fig. 3) dhe, duke u nisur prej saj, nxjerrjen e një numri molekulash të ndryshme të ADN-së nga grimcat.

Një nga llojet e PLR-së që kryhet në kohë reale është përdorimi i një agjenti ndërhyrës vikoristik, i cili shtohet drejtpërdrejt në përzierjen e reaksionit (më shpesh vikoristike SYBRGreen). Një lloj tjetër është përdorimi i një prej llojeve të sondave fluoreshente që lidhen me hapësirën në mes të produktit PLR, gjë që lejon rritjen e specifikës së zbulimit (div. Fig. 5). Zbulimi i fluoreshencës kryhet vazhdimisht gjatë reaksionit.

Përveç mundësisë së zbulimit të shpejtë, avantazhe të tjera të PLR në kohë reale zbulohen në përputhje me konventën. Ky version i PLR është më i thjeshtë, më i shpejtë dhe gjithashtu nuk kërkon hapjen e tubave me produkte PLR, gjë që redukton ndotjen e grimcave të tjera. Disavantazhi kryesor është performanca më e lartë e amplifikatorit për shkak të aftësisë së rritur për të zbuluar fluoreshencën në krahasim me origjinalin.

Kilkisna dixhitale PLR

Një variant i ri, i shtrenjtë dhe ende me gjerësi të ulët të PLR, i cili bën të mundur përcaktimin më të saktë të forcës së ADN-së në një mostër. Në këtë version, reagimi i përzierjes, e cila përmban barnberry fluoreshente, ndahet në një numër të madh vëllimesh mikroskopike (për shembull, pika në një emulsion). Pas kryerjes së PLR-së, analizohet se cila pjesë e pikave ka një reagim pozitiv dhe, me sa duket, vërehet fluoreshencë. Kjo pjesë do të jetë proporcionale me numrin e molekulave të ADN-së që gjenden në çdo individ.

PLR nga transkriptimi i anasjelltë

Para këtij ose një versioni tjetër të PLR, reagimi i transkriptimit të kundërt (ARN në ADN) me ndihmën e enzimës së revertazës pengohet. Kështu, kjo metodë lejon identifikimin e saktë të molekulave të ARN-së. Kjo mund të përdoret për të zbuluar viruset ARN ose për të përcaktuar nivelin e transkriptimit (mRNA) të një gjeni të caktuar.

Malyunok 1. Etapi PLR. Primerët janë të shënuar me një ngjyrë të kuqe.

Malyunok 2. Akumulimi i molekulave të dyfishta të ADN-së, të rrethuara me primerë, gjatë PLR.

Malyunok 3. Dinamika e reaksionit PLR në përqendrime të ndryshme të molekulave të ADN-së të gjetura në mostër. (a) – përqendrimi më i lartë (b) – përqendrimi i ndërmjetëm (c) – përqendrimi më i ulët

Malyunok 4. Elektroforeza e agarozës e produkteve PLR. K+ - kontroll pozitiv (pas pranisë së ADN-së që po zbulohet). 1-7 - gjurmë të mëtejshme (nga të cilat 1-2 janë pozitive, 3-7 - negative). Kontrolli K-negativ (video ADN sukana e ADN-së). Në shumë raste, përveç të gjithë produktit, janë të dukshme më shumë produkte të lehta jospecifike të reagimit (dimerë primer).

Malyunok 5. Metodat e zbulimit nën orën e vikoristannya PLR në orë. (a) – barnberry e ndërthurur – fluoreshon kur lidhet me ADN-në me dy fije (b) – Sonda Taqman – fluoreshenca ndodh kur sonda e ADN-së çahet nga një polimerazë e ADN-së me aktivitet endonukleazë 5'-3' për handikapin dhe fikësin e membranës fluoreshente. (c) – Sonda MolecularBeacon – fluoreshenca shfaqet gjatë hibridizimit të sondës me të gjithë fragmentin përtej hapësirës së fluoroforit dhe fikësit të largët (d) – Sondat LightCycler – fluoreshenca e pranuesit shfaqet gjatë hibridizimit të sondave të transferuara nya (FRET).

Reaksioni zinxhir i polimerazës (PLR, PCR) është një metodë për heqjen e kopjeve anonime të fragmenteve (gjeneve) të ADN-së nga një ekzemplar biologjik.

Thelbi i PLR si një metodë e biologjisë molekulare qëndron në kopjen e mostrës në shkallë të gjerë të gjenit të këngës (zgjatja e ADN-së) me ndihmën e enzimave speciale në tru. in vitro. Një tipar i rëndësishëm i PLR është heqja e një kopjeje të një pjese specifike të ADN-së (gjenit), e cila korrespondon me një mendje të caktuar. Një sinonim për procesin e kopjimit të ADN-së është "amplifikimi". Replikimi i ADN-së in vivo Ju gjithashtu mund të përdorni përforcim. Megjithatë, si rezultat i replikimit, seksionet e shkurtra të ADN-së (maksimumi 40,000 çifte nukleotide) amplifikohen gjatë reaksionit të polimerazës Lancug.

Parimet bazë

Gjithashtu, PLR është kopjimi i karbonazës i fragmenteve të ADN-së in vitro gjatë cikleve të temperaturës që përsëriten. Si ndodh procesi i reaksionit brenda një cikli të temperaturës?

Sinteza e heshtit nukleotidike kryhet nga enzima ADN polimeraza. Megjithatë, që kalliri të funksionojë, enzimës i duhet një platformë fillestare. Ashtu si Maidanët, "primerët" (farat) veprojnë si oligonukleotide sintetike me gjithsej 15-20 nukleotide. Ekzistojnë dy abetare (përpara dhe mbrapa), ato janë plotësuese me seksionet e shabllonit të ADN-së dhe vetë fragmenti i ADN-së, i rrethuar nga abetare, kopjohet nga polimeraza e ADN-së. Puna e polimerazës qëndron në shtimin sekuencial të nukleotideve plotësuese të sekuencës së shabllonit të ADN-së. Vetë Tim, në një cikël të temperaturës, përsëri sintetizon dy fragmente të reja të ADN-së (pasi molekula e ADN-së është Dolantsyuzhkova, atëherë ka dy matrica). Kështu, gjatë 25-35 cikleve, kampioni grumbullon miliarda kopje të grafikut të ADN-së të identifikuar nga abetaret. Struktura e një cikli të mbyllur mund të përfaqësohet si më poshtë:

Denatyrimi i ADN-së (shkrirja, shpërbërja e shtizave të ADN-së) – 95°C – 1 ose 2 hvilin;
rënia e abetareve (abetaret lidhen me shabllonin e ADN-së, temperatura e kësaj faze përcaktohet nga përbërja nukleotide e abetares) - 60 ° C (për shembull) - 1 hvilina;
Zgjatimi i ADN-së (polimeraza sintetizon ADN-në) - 72°C - 1 orë (lëreni për një orë derisa të sintetizohet fragmenti).

Baza praktike për testimin e metodës së reaksionit të polimerazës Lanziug në laborator duhet të përbëhet nga:

(ose çfarë tjetër quhet ciklues termik);
sistemet për s (për vizualizimin e rezultateve të PLR);
sistemet (për analizimin e rezultateve të PLR);
(Për përgatitjen e mostrës);
komplet (mekanik dhe elektronik).

Përveç pajisjeve kryesore dhe ndihmëse për funksionimin e plotë të laboratorit PLR, ka materiale të nevojshme: këshilla sterile, tuba, rafte për tuba dhe shpërndarës.

Baza e reagentit në laboratorin fillestar të PLR për kryerjen e një reaksioni të plotë të polimerazës Lancug përfshin enzimën ADN polimerazë me një tampon, abetare (fragmente të vogla sintetike të ADN-së plotësuese me rrjedhin dhe fundin e seksioneve të analizuara të matricës së ADN-së), shuma e nukleotide (A, T, G, C). Uji i pastruar është gjithashtu absolutisht i nevojshëm.

Përparësitë e metodës PLR

Ndjeshmëri e lartë e hetimit

Ndjeshmëria e metodës është e tillë që amplifikimi i PLR dhe identifikimi i sekuencës së synuar mund të arrihet në rastin kur ndodh një herë në 5 qeliza.

Specifikimi i analizës

PLR bën të mundur zbulimin e ADN-së së një agjenti specifik infektiv në prani të ADN-së së mikroorganizmave të tjerë dhe ADN-së së organizmit pritës, si dhe kryerjen e gjenotipizimit. Duke zgjedhur në mënyrë specifike komponentët e reagimit (primerët), ju mund të zbuloni menjëherë ADN-në e mikroorganizmave të lidhur.

Shkathtësia e metodës PLR

Në të djathtë, për PLR-diagnozën e sëmundjeve infektive dhe sëmundjeve ngjitëse te njerëzit, mund të përdorni të njëjtat njohuri, të ndiqni procedurat universale për përgatitjen e mostrave (kampioneve) dhe kryerjen e analizave, si dhe komplete të ngjashme reagentësh.

Kursimi i kohës

Një avantazh i rëndësishëm i PLR është numri i fazave të punës mikrobiologjike kulturore. Përgatitja e mostrave, kryerja e reaksioneve dhe analizimi i rezultateve të lehtësimit maksimal dhe shumë automatizimit. Në çdo rast, rezultatet mund të bien shpejt në 4-5 vjet.

Efikasiteti i metodës PLR

Gjerësia e materialit klinik të studiuar

Si rezultat i reaksionit të polimerazës Lanczyg, jo vetëm materiali biologjik mund të hiqet nga sëmundja, por edhe shumë substrate të tjera, në të cilat molekulat e ADN-së mund të identifikohen me lodhje të lartë, për shembull, uji, toka, produktet ushqimore, mikroorganizmat. , edhe me shume.

Të gjitha avantazhet më të rëndësishme të kësaj metode unike janë ndjeshmëria dhe specifika e lartë, identifikimi i agjentit infektiv dhe gjenotipizimi i çdo gjeni njerëzor, efikasiteti i lartë dhe kursimi i kohës, universale Nuk ka asnjë bazë praktike - metoda aktuale PLR mund të përdoret gjerësisht në diagnozën klinike. , praktikën mjekësore dhe kërkimin shkencor dhe pasurinë në fusha të tjera.

Zastosuvannya PLR

Zonat e stagnimit të reaksionit të polimerazës Lancug si rezultat i metodës aktuale të biologjisë molekulare janë të ndryshme. Ai është i pasur me gjerësinë e materialit që mund të analizohet (pothuajse gjithçka nga e cila mund të shihet më qartë ADN-ja mund të jetë objekt hetimi), si dhe abetaret e përzgjedhura. Fushat kryesore të zbatimit të PLR:

mjekësia klinike

ekologjisë

monitorimi i zhvillimit të dovkilla
analiza e produkteve ushqimore
analiza e organizmave të modifikuar gjenetikisht (OMGJ)

mjekësia e anijeve dhe mjekësia ligjore

Identifikimi individual
themelimi i Atdheut

farmakologjisë

mjekësi veterinare

kërkime shkencore (biologji molekulare, gjenetikë)

Organizimi i laboratorit PLR

Informacion për kontraktimin

Emri	Rreth nesh	Virobnitstvo	Metoda	Cat.Nr.

PLR - diagnoza e infeksioneve, një metodë e menjëhershme dhe me saktësi të lartë për zbulimin e sëmundjeve të ndryshme infektive. Cili është ndryshimi midis analizave të tjera?

Kjo shkurtesë është deshifruar si një reaksion polimerazë Lanzug. Sipas Wikipedia, Keri Mullis ka lindur në vitin 1983, historia amerikane. Për kontributin e tij, atij iu mohua çmimi Nobel.

Për herë të fundit, PLR fitoi vetëm duke përdorur metodën shkencore, pas së cilës u krijua me sukses nga mjekësia. Thelbi i hetimit qëndron në njohjen e agjentit infektiv në bazë të ADN-së dhe ARN-së. Sëmundja e lëkurës, duke depërtuar në ADN, ndryshon strukturën e saj në llojin e saj të ndryshëm. Me shikimin e ADN-së së ndryshuar, asistenti i laboratorit bëhet i vetëdijshëm se si shfaqet sëmundja te njerëzit. Ndër avantazhet e tjera të PLR:

Identifikimi i shkaktarit parësor të infeksionit që ka humbur “gjurmën” në ADN. Kur identifikohen shumë sëmundje, është e rëndësishme të identifikohen ato nga ku filloi gjithçka. Dhe për diagnozën e saktë dhe përzgjedhjen e një trajtimi efektiv, reaksioni i Lanzug ka një rëndësi të madhe;
Është instaluar në PLR pasi ADN-ja është ndryshuar, dhe në një fazë specifike të transformimit. Kjo është e nevojshme për të përjashtuar infeksionet e dyshimta;
Diagnostifikimi PLR është i ndjeshëm dhe zbulon praninë e baktereve dhe viruseve të vetme. Erërat mund të humbasin në gjak pas një banje të përshkruar gabimisht ose një ndërprerje të paplanifikuar të banjës. Sasia minimale e diagnostikuar gjatë deshifrimit të PLR është 10 ditë klienti. Metodat e tjera të testimit janë më të vogla;
Mikroorganizmat patogjenë zbulohen në varësi të manifestimit të simptomave të PPSS. Sëmundja e zbuluar në një fazë të hershme nuk zgjat aq gjatë sa forma e avancuar;
Rezultatet e PLR të sëmundjeve do të merren në dorë për ta përfunduar atë shpejt. Duhen pak më shumë se 4-6 vjet për të diagnostikuar infeksionet. Së bashku me deshifrimin, i gjithë procesi zgjat pak më shumë se 1-2 ditë;
Në një kohë, materiali i ADN-së nxirret për të kryer 5-6 teste. Një person i sëmurë nuk do të ketë mundësinë t'i nënshtrohet njollave shumë herë;
PLR dhe gjurmimi i infeksionit nuk qëndrojnë ende, kjo zonë po zhvillohet në mënyrë të qëndrueshme. Me zbulimin e sistemeve të reja të testimit me ndjeshmëri të shtuar, gjasat për kryerjen e ndjekjes zvogëlohen. Meqenëse më parë ishte në dispozicion vetëm për banorët e megaqyteteve, tani mjekët në klinikat spitalore në rajone nuk mund ta imagjinojnë trajtimin e sëmundjeve pa të.

Karakteristikat e metodës PLR:

Saktësia (korrigjimet janë minimale dhe frekuenca e tyre nuk kalon 0,01%);
Ndjeshmëria (testi "numëron" bakteret individuale në gjak dhe njolla);
Specifikimi (PLR zbulon infeksione që shpesh nuk manifestohen deri në një fazë të rëndësishme);
Unike (analiza e rezultateve në situata kur hetimet e tjera nuk zbulojnë asgjë).

Rezultatet e analizës PLR

Si funksionon metoda e reagimit të Lanzug dhe si përgatiteni para analizës?

Reaksioni Lanzug në trurin laboratorik transmeton shumëzimin e grafikëve të pasur me ADN dhe ARN duke identifikuar të njëjtën pjesë të dëmtuar. Acidet amplifikohen (konjugohen) me ndihmën e preparateve enzimatike. Duke përdorur enzimat vikoristike, asistenti i laboratorit heq kopje të mjaftueshme të fragmentit patogjen të ADN-së për të lidhur PLR-në nga simptomat e këtyre dhe sëmundjeve të tjera të provokuara nga infeksioni.

Si rregull, analizohen materialet biologjike të marra me kampionim ose njollë. Për identifikimin (deshifrimin e infeksioneve seksualisht të transmetueshme), merret një njollë nga epiderma, qafa e mitrës ose mitra për PLR. Ndonjëherë vikoristët luftojnë gjithashtu.

Për të konfirmuar ose zbuluar praninë e hepatitit, toksoplazmozës ose HIV-it, merrni gjak nga një venë. Gjaku i marrë nga gishti shpesh jep rezultate negative ndaj qumështit. Mononukleoza diagnostikohet pas grumbullimit të materialit të fytit të mushkës. Tuberkulozi mund të zbulohet pas grumbullimit të pështymës, siç shihet qartë te pacientët me plagë.

Një njollë nga mitra dhe qafa e mitrës për PLR është një analizë e thjeshtë, nuk ka asnjë mashtrim me të. 2-3 ditë para ngjarjes, do të inkurajoheni të bëni një jetë formale. Në ditët e sotme, xhelat dhe qumështi në bazë natyrale përdoren për higjienë të veçantë. Mund të pini ujë të ngrohtë nga rubineti. Ndaloni larjen - mbrëmjen para plagës në laborator ose zyrën e mjekut.

Trajtimi i mëllenjës me ndihmën e kremrave, pomadave, supozitorëve dhe spërkatjeve, siç kryhet, është gjithashtu i rëndësishëm. Një njollë merret në legenin e parë ose pas ose menjëherë pas menstruacioneve. Për të marrë rezultate të sakta, rekomandohet të mos shkoni në tualet për 2-3 vjet përpara se të merrni një njollë PLR.

Te personat që kanë reaksion Lanziug, merret një shtupë nga uretra. Materiali biologjik mblidhet duke përdorur një sondë sterile ose shtupë pambuku, e cila futet në farë. Gjatë orës së procedurës, mund të përjetoni siklet të lehtë ose ënjtje të mëlçisë. Njerëzit gjithashtu duhet të kalojnë shumë kohë duke mësuar për seksin dhe higjienën. Përcaktohet periudha para analizës, trajtimi me antibiotikë dhe barna të tjera. Nëse shqetësimi vazhdon pas grumbullimit, rekomandohet të shkoni në klinikë sa më shpejt të jetë e mundur.

Është e pranueshme që pacienti t'i nënshtrohet analizave të gjakut ose një njollë të marrë nga organet e pacientit. Materiali gjenetik vendoset në një pajisje amplifikimi PLR dhe aty shtohen enzimat. ADN-ja nxehet në 90-95 ° C derisa litarja të formohet në një hell. Ky proces quhet denatyrim. Gjatë orës së funksionimit të reaktorit, nga një mostër e ADN-së dhe ARN-së, krijohen mijëra kopje për analizë (deshifrimin e reaksionit).

Rezultatet e diagnostikimit të PLR

Reagimi i Lanzug tregon ashpërsinë e infeksionit, dhe saktësisht numrin e komplikimeve të dukshme. Zbërthimi i shkëmbinjve të mbetur është futja individuale e gjeneve të mutacionit në ADN-në e njeriut në mënyrë që të zbulohet aftësia për të ndryshuar gjenotipin.

Çfarë zbulon diagnoza e infeksionit PPR?

Dekodimi i rezultateve të analizës është qartë i dukshëm për mjekun e kualifikuar. Fuqia e reaksionit Lanczyg na lejon të konfirmojmë ose zbulojmë praninë e sëmundjeve të tilla:

Siç është e qartë nga kjo listë, diagnostifikimi PLR u ofron mjekëve një gamë të gjerë specialitetesh shumë të specializuara pa aftësi të kufizuara. Metoda mund të përdoret në pulmonologji, virologji, sëmundje infektive, onkologji, gastroenterologji, hematologji, gjinekologji dhe urologji.

Deshifrimi PLR: rezultatet

Analizat e reaksionit Lancug vlerësohen nga mjekët individualisht për një pacient të lëkurës me patologji të dukshme dhe sëmundje kronike. Rezultatet e analizave të PLR tregojnë, siç u tha më lart, karakteristikat specifike të baktereve patogjene. Gjatë trajtimit të tyre, mjeku përcakton fazën e ashpërsisë dhe fazën e sëmundjes. Bazuar në këta tregues, tregohet më tej dozimi i barnave dhe kohëzgjatja e kursit të trajtimit.

Një rezultat negativ i PLR do të thotë që materiali biologjik i mbledhur shfaq çdo ditë ndonjë virus ose infeksion. PLR pozitive është një sinjal para alarmit. Gjithashtu, një infeksion u zbulua në gjak dhe zona të tjera biologjike të pacientit.

Nëse vlerat janë minimale, mund të flisni për praninë e thjeshtë të sëmundjes, dhe jo vetëm për zhvillimin aktiv të sëmundjes. Një bartës i thjeshtë i infeksionit, i cili manifestohet vetëm në PPR, por nuk shfaq simptomat e tjera të zakonshme, duhet të konsultohet vazhdimisht nga mjeku.

Është e rëndësishme të mos bëni panik dhe të mbani mend se shumica e viruseve të njohura për shkencën mund të trajtohen me ilaçe antibakteriale. Përzgjedhja e tyre dhe zëvendësimi i një me një në rast joefektiviteti mund të privojë kualifikimet e mjekut, siç dëshmohet nga trajtimi i kësaj dhe sëmundjeve të tjera.

Deshifrimi i PLR mund të kryhet jo vetëm në diskrecionin e mjekut, por në diskrecionin e autoriteteve. Shpesh kemi frikë nga gratë që planifikojnë të mbeten shtatzënë në të ardhmen e afërt për të shmangur mundësinë e sëmundjeve seksualisht të transmetueshme. Kur vendoset në konsultën rajonale me pacientin, nuk ka nevojë për një diagnozë të plotë.

PLR është përshkruar për gratë e detyrueshme, të cilat kanë pasur një numër të vogël abortesh ose abortesh për arsye të ndryshme. Para EBC, kryhet një analizë për të identifikuar të gjitha shkaqet e dëbimit të mundshëm të vezës së fekonduar.

Njerëzit shpesh kryejnë PLR pas lirimit, gjatë orës së një lloj romance pushimi ose dasme. Diagnostifikimi i ndihmon ata të mos rrezikojnë jetën e tyre dhe shëndetin e partnerëve të mundshëm seksualë.

Shpesh, PLR është e vetmja mundësi që një pacient të shërohet nga sëmundja në fazën embrionale, nëse rreziku i panevojshëm ndërlikohet nga një udhëtim i vështirë.

Një njollë duke përdorur metodën PLR për diagnostikimin e sëmundjeve infektive mund të bëhet më e rëndësishme:

Diagnostifikimi i drejtpërdrejtë i sëmundjeve dhe sëmundjeve infektive.

Shumë metoda tradicionale të diagnostikimit laboratorik mbështeten në zbulimin e sëmundjeve të përditshme për shenja të ndryshme indirekte. Për shembull, diagnostikimi ELISA bazohet në proteinat e zbuluara në gjakun e pacientit, të cilat janë produkte të zbërthimit të agjentëve infektivë, në bazë të të cilave mjeku mund të bëjë një diagnozë tjetër. Metoda e analizës PLR siguron një tregues të drejtpërdrejtë të pranisë së një kampioni specifik të ADN-së të sëmundjes në materialin e marrë nga pacienti.

Specifikimi i lartë i diagnostikimit PLR.

Gjatë procesit të analizës, materiali i ekzaminuar zbulon një fragment të ADN-së që është specifik dhe ka fuqi për një organizëm të caktuar - qoftë një bakter ose një virus. Kjo pjesë e ADN-së është unike dhe jo tipike për një infeksion të kafshëve në tokë.

Ndjeshmëri e lartë e PLR.

Infeksionet mund të ndodhin nëse materiali i marrë nga pacienti përmban më pak se një qelizë bakteri ose virusi. E krahasueshme me metodat e tjera diagnostike imunologjike dhe mikrobiologjike: ndjeshmëria e analizës PLR - 10-100 qeliza për mostër, metodat e tjera - 103-105 qeliza.

0 Array (=> Analizon) Array (=> 2) Array (=>.html) 2

Shkathtësia e analizës PLR.

Për hetimin e PLR, është e mundur të përdoret praktikisht çdo material që nuk është i disponueshëm për hetim me metoda të tjera: mukus, prerje, gjak, serum, gëlbazë, ejakulat, gërvishtjet e qelizave epiteliale - fragmente, etj. Infeksioni mund të ndodhë në çdo biologjik materialeve ose indeve.

Ekziston një shkallë e lartë e mbështetjes për rezultatet e analizës PLR.

Një metodë uniforme për të gjithë përpunimin e materialit të marrë nga një pacient për analizë, zbulimin e produkteve të reagimit, amplifikim i automatizuar PLR lejon një diagnozë të re PLR në 4-5 vjet. Në të njëjtën kohë, shumë më shumë se një orë shpenzohet në metodat kulturore të vëzhgimit - nga shumë ditë në shumë ditë, pasi është e nevojshme të shihet, dhe më pas të zhvillohet patogjeni në kulturën qelizore.

Mundësia e diagnostikimit të çdo lloj infeksioni.

Ndjeshmëria e lartë e metodës PLR bën të mundur diagnostikimin e infeksionit jo vetëm në fazën akute të sëmundjes, por edhe zbulimin e infeksioneve kronike dhe identifikimin e baktereve dhe viruseve të vetme.

Një njollë duke përdorur metodën PLR bën të mundur zbulimin e infeksioneve që nuk mund të zbulohen me një shpifje të florës: klamidia, ureaplazmoza, mykoplazmoza, herpesi gjenital.

Cilat janë avantazhet e rëndësishme të metodës së hetimit dhe diagnostikimit PLR? Mangësitë e diagnostikimit PLR përfshijnë:

Mundësia për të marrë një rezultat pozitiv

Analiza PLR mund të tregojë një rezultat pozitiv nëse infeksioni tashmë është i vdekur, "i vrarë" nga antibiotikët dhe qelizat e vdekura janë ende të vendosura në indet e pacientit. Si eshte e mundur? Shumë thjesht. Për shembull, infeksioni jeton në indet e epitelit (në mukozën e organeve ose syve). Ata të dy e shijuan atë. Duhet një orë për të "rinovuar" epitelin e qelizave. Nëse materiali merret nga mjeku përpara se qelizat të rinovohen plotësisht, materiali mund të përmbajë qeliza të vdekura të infeksionit. Klitini, padyshim, heq materialin gjenetik - ADN-në ose ARN-në e trupit, gjë që mendon PLR. PLR nuk i ndan qelizat e vdekura nga ato të gjalla: ai kërkon ADN-në dhe i "klonon" ato në një numër të madh. Rezultati i një analize të tillë është pozitiv. Në fakt, është e vërtetë që ne jemi hybnopozitiv.

Paaftësia e PLR për të "rikuperuar" një infeksion të vdekur nga një i gjallë e bën të vështirë zbulimin e PLR dhe kontrollin e efektivitetit të trajtimit. Rregulli kryesor, natyrisht, është të sigurohet që tepricat e vdekura të infeksionit të eliminohen plotësisht nga trupi, të cilin një person mesatar i mbijeton për 4-8 vjet. Prandaj, pas marrjes së tabletave të mbetura antibiotike, metoda PLR mund dhe duhet të përdoret për të monitoruar efektivitetin e trajtimit.

gastroenterologji kompleksi diagnostik - 5360 rubla

Kursime TILKI IN BEREZNY - 15%

1000 rubla Marrja e EKG-së nga dekodimi

- 25%fillore
vizitoni një mjek
terapist në fundjavë

980 fshij. takimi i parë me një hirudoterapist

takim me një terapist - 1130 rubla (alternuar 1500 rubla) "Vetëm gjatë javës, të shtunave dhe javëve, të vizitoni një terapist me një zbritje prej 25% - 1130 rubla, në vend të 1500 rubla (procedurat diagnostike paguhen sipas listës së çmimeve)

Në një fazë të mëvonshme, kontrolli i ndalimit mund të bëhet duke përdorur një metodë të ndryshme kulturore, ose me mbjellje: vetëm mikroorganizmat e gjallë që riprodhohen mund të shërbejnë si shenjë e jodhunës.

Nuk këshillohet përdorimi i analizës PLR për diagnostikimin e gardnerelozës, pasi gardnerelli - të sëmurët nga kjo sëmundje, në një numër të vogël rastesh, normalisht jetojnë në tokë. ADN-ja e këtyre baktereve me PLR vikoristike së shpejti do të humbet. Gardnerella nuk shfaqet në një njollë dhe bakterioskopia në këtë rast është një metodë e mjaftueshme për diagnostikimin e gardnerelozës dhe monitorimin e trajtimit.
Shumëllojshmëri mikroorganizmash

Çdo mikrob mund të ndryshojë, dhe në të njëjtën kohë si ADN-ja. Të pasmet më të bukura nga kjo galus është virusi i gripit. Duke qenë i sëmurë një herë, një person zhvillon antitrupa kundër virusit. Thjesht teorikisht, nëse jemi sëmurur me grip qoftë edhe një herë, atëherë ashtu si me gripin, nuk është faji ynë që do të sëmuremi përsëri. Pothuajse kemi një dhimbje në fyt. Cila eshte arsyeja? Virusi "muton", duke "ndryshuar" pak gjenomën e tij dhe sistemin tonë imunitar, antitrupat tanë nuk e "njohin" më mysafirin e vjetër në një pamje të re. Nuk është çmenduri që po sëmurem përsëri nga gripi...

Gjatë projektimit të një përforcuesi (sistemi i testimit PLR), zgjidhet një fragment i ADN-së specifik për një mikroorganizëm të caktuar që është më pak i ndjeshëm ndaj ndryshimit. Është "përzgjedhur" nga i ashtuquajturi seksion shumë konservativ i ADN-së. Përndryshe, bollëku i mikroorganizmave mund të çojë në faktin se disa gjenotipe ose shtame të organizmit të vëzhguar mund të shkaktojnë mutacione në gjenom, i cili amplifikohet (klon), dhe kështu bëhet i pakapshëm i dhënë nga sistemi i testimit.

Kështu, sisteme të ndryshme testimi janë një nga arsyet pse analizat e kryera në laboratorë të ndryshëm dhe në klinika të ndryshme duke përdorur të njëjtën metodë PLR mund të tregojnë rezultate diametralisht të ndryshme. Për të shmangur sa më shumë mutacionet, tani janë zhvilluar standarde për të rregulluar testimin (përfshirë testimin e reagimit të kryqëzuar, si dhe testimin e shtameve shtëpiake që tregohen), i cili kërkon sistemin e testimit, gjëja e parë që duhet të dalë në treg dhe A do të përdoret Vicoristan për të diagnostikuar shëndetin tuaj Pse klinikat dhe laboratorët e mirë përdorin Vicoristan për gjeneratat e mbetura të sistemeve të testimit. Dhe qendra jonë mjekësore “Euromedprestige” është një nga të paktat që mund t'u ofrojë klientëve të saj një diagnozë të qartë.