Hemoroid için yardımınız. Sağlık portalı
Siteyi ara

PCR yöntemini kullanarak PCR teşhis analizi nasıl yapılır. Yüksek soruşturma hassasiyeti

PLR (polimeraz Lanzug reaksiyonu), 20. yüzyılın sonu ve 21. yüzyılın başında klinik laboratuvar teşhisinin ana yöntemlerinden biri olan ve tıp biliminin çeşitli hastalarına büyük zarar veren moleküler biyolojinin bir başarısıdır.

Öyle ki, insan vücudundaki milyonlarca hücrenin ortasında, yaşayan virüsün kendisi değil, yalnızca DNA'sının bir kısmı yok edilir, o zaman PLR, rahatsız edilemeyeceği için belki de yok olur. Sonuç olarak ona “uzaylı”nın varlığı hakkında olumlu bilgi vermeye çalışın. PLR'nin özü ana avantajıdır.

Hidrasyon ve eksiklikler

PLR teşhisini gerçekleştiren bir laboratuvarın, test sistemlerinin kullanılabilirliğine ve tıbbi personelin niteliklerine yüksek düzeyde ihtiyacı vardır. Burası, oldukça hassas ve oldukça spesifik reaktiflerden oluşan iyi düzenlenmiş bir cephaneliğe sahip, yüksek teknolojiye sahip bir laboratuvardır, dolayısıyla özel bir eksiklik yoktur. Klinik belirtilerin yokluğunda olumlu sonuç veren ve dolayısıyla doktoru ikilemle karşı karşıya bırakan herhangi bir şey: Tedaviye başlamalı mıyız, başlamamalı mıyız?

Hastayla ilgilenen doktor, herhangi bir hastalık belirtisi olmadığı sürece test sonuçlarının güvenilirliğinden şüphe etmeye başlar. Ancak PLR sisteminin yüksek hassasiyeti, klinik öncesi aşamada bir uyandırma çağrısı ortaya çıkardığı hafızasına dayanmaktadır ve bu durumda olumlu bir sonuç, çok da uzak bir ihtimal değil, bir yıldan daha kısa sürede elde edilir. Buna dayanarak doktor, "lehinde" ve "aleyhine" diğer argümanları dikkate alarak tedavinin yararlılığı konusunda kendi kararlarını vermekten sorumludur.

Polimeraz Lanziug reaksiyonunu kullanarak teşhis yapmanın avantajları açıktır:

  • Yüksek özgüllük% 100'e ulaşan, belirli bir organizmada güçlü veya insanlara yabancı olan nükleik asit parçacıklarının numunesindeki varlığına bağlıdır;
  • Yüksek verimlilik hatta PLR bile materyalin toplandığı gün test yapılmasını ve herhangi bir endişe durumunda hastanın rutin olarak tedavi edilmesini mümkün kılan yüksek teknolojili otomatik bir tekniktir;
  • Tek bir arıza üzerinde çalışan PLR, bir dizi araştırmayı yürütebilir. birkaç tatili açıkla sanki o çok büyük bir hazineymiş gibi. Örneğin, klamidya enfeksiyonunu teşhis ederken, PLR ana yöntemlere uygulandığında, klamidya için bir alarmist olan Neisser (gonokok) tespit edilebilir. Ayrıca sonuçların güvenilirliği üzerinde olumsuz bir etkisi yoktur;
  • PLR yöntemini kullanarak test etme kuluçka döneminde güvensiz mikroorganizmaları ortaya çıkarır Hastalık henüz vücudun sonuna ulaşmadıysa, erken teşhis patolojik sürecin gelecekteki gelişimini öngörür, bu da yeni bir şeye hazırlanmayı ve onu bütünden kabul etmeyi mümkün kılar.

Ayrıca PLR, teşhis sırasında bazen ortaya çıkan karışıklığı ortadan kaldırmak için, sonuçlarının uzman verilerde vikorizasyon yöntemiyle veya ihtiyaç duyulması halinde kayıt altına alınabilmesi (fotoğraf, bilgisayar) özelliği ile kendisini korumaktadır.

PLR türlerindeki norm, olumsuz sonuçlara değer vermektir Yabancı nükleik asit parçalarının varlığını gösteren pozitif bir kanıt, vücutta enfeksiyonun varlığını gösterir, dijital değerler virüsün gücünü ve test sırasındaki konsantrasyonunu gösterir. Proteo, “PLR” konusunda özel bir çalışma yapan bu doktorun analizini dışarıdan deşifre etti. Sonuçları kendi başınıza yorumlamaya çalışmanın bir anlamı yok, çünkü her şey olur olmaz yanlış anlayabilir ve övünmeye başlayabilirsiniz.

PLR neyden korkuyor, ne yapabilir ve buna nasıl hazırlanabiliriz?

Diğer araştırmalar gibi, Bazen test sonuçları pozitif ya da negatif olabilir, de PLR ​​​​suçlanacak değil. Bu gibi durumlarda aşağıdakiler meydana gelebilir:

  1. Reaksiyonun aşamalarından birinde teknolojik sürecin bozulması;
  2. Nedotrimannya malzemenin toplanması, korunması ve taşınmasına ilişkin kurallar;
  3. Malzemede üçüncü taraf unsurların varlığı.

Yani PLR - enfeksiyonların teşhisinden önce ona saygılı, dikkatli ve doğru yaklaşmak gerekir, aksi takdirde malzemenin yapısı değişebilir veya tamamen çökebilir.

PLR teşhisinin aşamaları. Milkov'un sonuçları soruşturmanın herhangi bir aşamasında bozulabilir.

Enfeksiyonların PLR teşhisi, diğer laboratuvar yöntemleri arasında "altın standartlar" kategorisine girer; bu, ilk bakışta ciddi bir şey önermeyen günlük hastalıkları kendi başınıza tespit etmek için kullanılabileceği anlamına gelir:

  • Çeşitli lokalizasyonların tüberkülozu, pnömoni (klamidyanın neden olduğu atipik pnömoni dahil);
  • Çocukluk çağı enfeksiyonları (inek kızamıkçık, kabakulak, cıvıltı);
  • Difteri;
  • Salmonella;
  • Zoonotik bulaşıcı hastalık - listeriyoz (hastalık, lenf düğümlerine, merkezi sinir sistemine, iç organlara verilen hasara bağlı olarak çeşitli semptomlarla karakterize edilir);
  • Epstein-Barr virüsünün neden olduğu hastalıklar (bulaşıcı mononükleoz vb.);
  • Papilomavirüs enfeksiyonunun (bu tip IDP) neden olduğu onkolojik patoloji;
  • Boreliosis (Lyme hastalığı, kene kaynaklı ensefalit);
  • Helicobacter pylori enfeksiyonu, kişinin vulvasında yaşayan Helicobacter pylori mikrobunun neden olduğu bir enfeksiyondur. Helicobacter pylori'nin skutum veya 12 basamaklı kolon kanserinin gelişmesine neden olduğu kanıtlanmıştır;
  • ve pratik olarak her şey.

Devlet tarafından bulaşan enfeksiyonların PLR tanısı, bu şekilde çığlık atan hastalık parçaları genellikle herhangi bir klinik belirti olmadan uzun süre geçtiğinde, daha sonra ciddiyet aktif hale gelmeye başladığında özellikle önemlidir. Çocuğun sağlığını tehdit eder ve hayatını mahveder. i'yi de aynı şekilde kullanın. Onlardan gelen eylemler (“meşale”) derhal ve ІПШ'a kadar kurulur, daha sonra geri kalanı raporun değerlendirilmesini gerektirir. Makalenin ilerleyen bölümlerinde en popüler yöntemler hakkında daha fazla bilgi edinebilirsiniz.

Güvenilir bir sonuç elde etmek için doğru şekilde nasıl hazırlanılır?

PLR için hazırlığın basit olduğunu ve hastanın herhangi bir özel çabasını gerektirmediğini unutmamak önemlidir. Üç garip görevi imzalamak gerekiyor:

  1. Analiz tarihinden 24 yıl önce makaleye başvurmayın;
  2. Damardan kan almak ve tahlil yapmak için oruç teknesine gelmeniz gerekir, ancak konuşmadan içemezsiniz;
  3. En kısa sürede bana verin (steril bir kavanozda, eczanenin önüne koyun).

PLR herhangi bir biyolojik ortamda yapılabilir

PLR yöntemi “kana susamışlığa” müdahale etmez, bulaşıcı ajanların bulaşmasını önlemek için biyolojik bir ortam kullanır. seçin – daha ileri inceleme için alınması gerekenler doktora gönderilecektir.

Bu şekilde, alarm arayışında kan analizine ek olarak (gerçi diğer materyallere de yaklaşabilir ve çoğu durumda paralel olarak ilerleyebiliriz), vikorizasyon yapabilirsiniz:

  • (Ürogenital sistemin vizyonu);
  • Ağız, konjonktiva, nazofarenks ve arterlerin mukoza zarlarından bir parça (kadınlar için rahim ağzından ve kas sisteminden, erkekler için üretradan alın);
  • Slinu;
  • Sperm;
  • ön asmadan;
  • Plasenta dokusu ve amniyotik sıvı (amniyotik sıvı);
  • Örneğin IPSS ve mikobakteri tüberkülozu türlerini tanımlamak için çökeltme (santrifüjlemeden sonra);
  • Aynı madde ile balgam ve plevra sıvısı;
  • eksüda;
  • Merkezi sinir sisteminde bulaşıcı bir lezyon şüphesi varsa omurilik;
  • Karaciğer, 12 tırnaklı bağırsak, scute vb. dokulardan alınan biyopsi materyali (bioptat)

Yukarıdakilerden önce, her durumda, kazımalarda ve gözlemlerde test edilecek malzemenin yeterli olacağını, PLR yöntemiyle yapılan bazı testlerin fazla çaba gerektirmediğini, analizin birçok kişiyle sınırlı olduğunu eklemek isterim. Ependorf tipi bir mikrotüp alıp Vivchennia'ya göndermeniz gerekiyorsa.

Hastalık ve durgunluk PLR

VIL ve polimeraz Lanzug reaksiyonu

Anonim testlerden geçerseniz ve olumlu sonuçlar alırsanız, immünoblotlama teşhisi tekrar tekrarlanmalıdır. Teşhis doğrulandıktan sonra hastaya ek araştırmalar reçete edilir:

  1. CD 4 lenfositlerinin (immünokompetan hücreler - T yardımcıları veya böbrek hücreleri) mutlak değerlerinin ek immünolojik reaksiyonlarına dayanarak, hangi enfeksiyon bize ilk önce çarpar, ardından kaybederler Ve ana yetkililer “onları yok edemez” kendisinin ve başkasının.” Kan plazmasında dolaşan RNA virüsü, vücuttaki normal hücrelerle karıştırılıyor ve onlara tepki vermiyor;
  2. RNA virüsünün PLR yöntemiyle tespiti ve viral partikül konsantrasyonunun evreye, patolojik sürecin ciddiyetine ve bu verilerin dengesine dayalı prognoza göre dağılımı. Açıkçası planda “norm” kelimesi eksik, dolayısıyla tepki her zaman olumlu oluyor ve dijital değerlerin deşifre edilmesi doktorun yetkinliğine giriyor.

PLR ve hepatit

PLR yöntemi hepatiti tespit edebilir, çoğu zaman test, diğer yöntemlerle yetersiz teşhis edilen hepatiti teşhis etmek için kullanılır.

Hepatit C virüsü (RNA), insan vücudundaki davranışından sorumludur. Karaciğer hücrelerinin (hepatositler) genomuna sıkışıp kalan bu adam, 2 yıl ya da 20 yıl içinde gelebilecek doğru zamanda orada kalır, bu nedenle doktorlar ona "ölü katil" adını verdiler. Hepatit C, karaciğer parankiminde daha sonraki aşamalarda kendini gösteren malign bir sürecin gelişmesine yol açar. Bağışıklık sistemi tüm bunları işaretlemiyor ve virüsü hepatosit sanıyor. Ancak çoğu durumda virüse karşı antikorlar üretilir ve bunlar bağışıklık sistemini korumaz. Hepatit C için ELISA'nın teşhisi için çok bilgilendirici değildir, çünkü virüsün izlerini kaybettiğini ve kendisinin enfekte olup olmadığının bilinmediğini gösterir. HCV enfeksiyonu vakalarında, virüse karşı antikorlar kaybolduğundan ve sonsuza kadar dolaşımda kaldığından (immünolojik hafıza) kendi kendine yok olma meydana gelir. PLR, antikorların oluşturulmasından önemli ölçüde önce gelir ve viral bir partikülü 1-1,5 gün gibi erken bir sürede tespit edebilirken AT, doğumdan 2 ay önce aralıklarla ortaya çıkabilir.

Hepatit C virüsünün insan vücudunda yayıldığından şüphelenilen durumlarda PLR teşhisi, en uygun araştırma yöntemidir, çünkü yalnızca bir hastanın kanında veya karaciğer biyopsisinde "yasal bir ajanın" varlığını tanımak mümkündür. .

Ancak bazen AT pozitif, PLR sonucu negatif ise nöbet yaşanabilir. Bu yöntem, virüsün yoğunluğu çok düşük olduğunda veya kan dolaşımına girmeden karaciğere "uyku halinde" girdiğinde kullanılır. Gerçeği bilmek için hastadan, hatta birden fazla tekrar tahlil alınır.

Papilomavirüs enfeksiyonu

Kendi kendine enfeksiyonun oluşması imkansız olduğu gibi, PLR parçaları olmadığı için fiyatından şüphelenmediğim hükümdarın vücudunda hiçbir şey göstermeden uzun süre devam etmesi de mümkündür. gelişti ve hastalığın belirtileri günlüktü. Bununla birlikte, ister latent ister latent olsun, papillomavirüs enfeksiyonunun varlığı kişinin sağlığı açısından iyi olmaktan uzaktır ve özellikle kansere neden olan virüs tipini (tip 16, 18) taşımak tehlikelidir.

Çoğu zaman, nüfusun yarısı ÜİYOK'ten muzdariptir, çünkü virüsün kadın vücut bölgesini ve özellikle de farklı virüs türlerinin displastik süreçlerin gelişmesine neden olduğu rahim ağzını ve daha sonra rahim ağzı kanserini etkileme olasılığı daha yüksektir. vaka Displaziyi durdurun ve virüsü serbest bırakın. Yani eksen, polimeraz Lanzug reaksiyonu viral DNA'yı ortaya çıkarıyor ve ardından ya "kötü" ya da "iyi" (onkojenik veya onkogenik olmayan) tip kadının vücuduna yerleşiyor.

Diğer IPSS ve TORCH enfeksiyonları

Açıkçası, polimeraz Lanczug reaksiyonu, nükleik asitlerden oluşan herhangi bir yabancı yapıyı tespit edebilir; bu da testi, her zaman tespit edilemeyen tüm SPS ve TORCH enfeksiyonlarını tanımlamak için uygun hale getirir. Mevcut ve daha ucuz olan gonokokları tespit etmek için bu kadar pahalı araştırmalar yapmak mümkün müdür?

TORCH enfeksiyonları ve IPSS birbiriyle bağlantılı olduğundan hangi grubun birbirine atanması gerektiğinin belirlenmesi önemlidir. Büyümeleri zor olabilir, çünkü ya sadece genç beyinler için (bağışıklık yetersizliği) devlet davranışıyla bulaşabilen ya da onlar için daha ilginç hale gelebilen farklı mikroorganizma gruplarına maruz kalmayacaklardır. geçişleri ve hamilelikleri üzerinde olası bir olumsuz etki.

PLR, edinilen enfeksiyonları tespit etmenin ana yöntemidir

Klinik belirtilerin gelişimi, hem ELISA hem de PLR'nin ana görevleri olan yalnızca PLR'nin gücüyle belirlenen çeşitli faktörlere dayanmaktadır. Özellikle hastalık belirtileri için tek bir doğrulayıcı test olarak. Böyle zor bir duruma, bariz hastalıkların yanı sıra zihinsel patojenleri de içeren polimikrobiyal bir enfeksiyon neden olabilir.

Ureaplasma en sık mikoplazmalı çiftlerde görülür. Boşuna değil. Bu türler, tıpkı klamidya gibi, ne virüs ne de bakteridir; hücrelerin ortasında yaşarlar ve IPSS ile ilişkilendirilebilirler; ancak sağlıklı bir vücutta bulunmaları da nadir değildir. Bu nedenle, hasta bir kişiden sağlıklı bir burnu çıkarmak için özel yöntemler gereklidir ve bu mikroorganizmaların davranış özelliklerine bağlı olarak en güvenilir olanı PLR olarak kabul edilir, diğerlerinden tutarlılığa kadar etkisiz görünmektedir.

Sorun nedir (tip 1, 2) ve aynı zamanda herpes virüsüyle (tip 5) de ilgili olan şey nedir, o zaman buradaki durum belirsizdir. Dünya nüfusunun enfeksiyon oranı %100'e yaklaşıyor, dolayısıyla bu dönemde özellikle virülansta rol oynayan virüsün ve dozunun belirlenmesi çok önemli, hatta yetişkin insanlarda bile virüs vücudunda kök salmış durumda. , çoğu zaman susuzluğa neden olmaz ve hastalık belirtisi vermez.

Bu nedenle, böyle bir reaksiyon için doktor reçetesini göz ardı etmemelisiniz ve hatta bazı durumlarda, polimeraz Lanzug reaksiyonu, yalnızca kadınları ciddi komplikasyonlardan değil, aynı zamanda küçük bir kişiyi de koruyabilen zorunlu ve gerekli bir laboratuvar teşhis yöntemidir. henüz doğmadım.

PLR gibi mucizevi bir yöntemin 30 yılı aşkın süredir insanlığa hizmet ettiğini anlamak isteriz. Bu testi yaparken bulaşıcı hastalık riskiyle sınırlı kalmamak gerekir. Moleküler biyoloji alanında popüler hale gelen polimeraz Lanzug reaksiyonu genetikle ayrılmaz bir şekilde bağlantılıdır. Belirli bir kişiyi tanımlamak için bir suç soruşturmacısı ile başarılı bir şekilde iletişim kurar, gemi hekimliğinde veteriner hekimliğinin kurulması için, veteriner hekimliğinde, hayvanlar için bir klinik olarak, yolda ve diğer alanlarda (sanayi, kırsal yönetim vb.) mülk satın alınabilir.

Video: PLR - bu durgunluğun özü

Bakteri genetiği Başka bir aktivite için bilgi.

Polimeraz Lanzug reaksiyonu

Polimeraz Lanczug reaksiyonu, analiz edilen numunedeki (biyolojik materyal veya saf kültür dahil) bir dizi DNA molekülünün büyük bir artışına (amplifikasyonuna) izin veren bir yöntemdir.

Mikrobiyolojide bir teşhis yöntemi olarak PLR'nin ana avantajları, örneklerdeki son derece düşük patojen konsantrasyonlarının tespitine olanak tanıyan çok yüksek hassasiyetinin yanı sıra, jenerikteki canlıları tanımlamaya olanak tanıyan düzenlenmiş özgüllüktür. , tür veya alt spesifik düzey. PLR'nin ana kısmı yüksek duyarlılığından kaynaklanmaktadır; numuneler, pozitif kontrolden veya PLR ​​üründen DNA'yı kolayca kirletebilir ve bu da negatif-pozitif reaksiyona yol açacaktır. Bu, PLR ile bitmiş PLR ürünleriyle çalışmanın karıştırıldığı zihinlere ciddi kısıtlamalar getirmektedir.

PLR gerçekleştirdi. Aşağıdaki bileşenleri birleştirmek için bir reaksiyon karışımı hazırlanmaktadır:

    İzlenen örnekten DNA gördüm.

    Buferny Rozchin

    Mg2+ iyonları (enzim için gerekli),

    İki primer, tespit edilen farklı DNA dizilerinin uçlarını tamamlayan, tek sarmallı kısa DNA molekülleridir (çoğunlukla 18 ila 24 nükleotid uzunluğunda).

    Deoksinükleotid trifosfatları toplayın.

    Isıya dayanıklı DNA polimeraz (çoğunlukla vikorize edilmiş Taq polimeraz - polimeraz Termos sucul bitki).

Daha sonra bu reaksiyon aslında bir termostat tarafından programlanan bir amplifikatöre yerleştirilebilir. Amplifikatörde 30-40 döngü sıcaklık değişimi gerçekleştirilir. Bu döngülerdeki cilt üç aşamadan oluşur (böl. Şekil 1):

    Denatürasyon (sıcaklık 94°W) – su mızrakları patlar ve DNA mızrakları birbirinden ayrılır.

    Primerler düşmüş (sıcaklık 50-60°C civarında) – primerler DNA dizilerinin uçlarına eklenmiş. Bu arada, düşük sıcaklıklarda, izlenen parçadan çıkan DNA iplikçiklerinin yükselişi (renatürasyon), reaksiyon karışımındaki primerlerin konsantrasyonunun, primerlerin konsantrasyon konsantrasyonundan birkaç kat daha büyük olması nedeniyle enerji açısından daha elverişlidir. dizideki DNA (örneğin, PLR'nin koçan döngüleri üzerinde), böylece primerlerin reaksiyonu DNA boyunca ilerler. Erime sıcaklığı, primerlerin erime (denatürasyon) sıcaklığına göre seçilir.

    Uzama (sıcaklık 72 °C) – DNA polimeraz, uzun DNA matrisinin primerlerini üretir. Sıcaklık, vikorize DNA polimerazın üretimi için en uygun sıcaklığı gösterir.

Sonuçların tespiti PLR'nin farklı versiyonlarına göre farklılık gösterir ve "PLR Türleri" bölümünde açıklanmaktadır.

PLR Dinamiği

Erken PLR döngülerinde, boyutu primer iniş bölgeleri arasındaki konuma göre belirlenen bir dizi çift DNA molekülü, cilt döngüsü ile etkileşime girer. Bu şekilde, ekstrakte edilebilecek az sayıda mevcut DNA molekülü yaratılır (böl. Şekil 2).

Bu nedenle, erken döngülerde, PLR ürününün gücü m*2n formülüyle tanımlanır; burada m, örnek DNA'nın verimi, n ise döngü sayısıdır. Daha sonra reaksiyon bir platoya ulaşır. Bu, reaksiyon ürününün birikmesi, primerlerin ve deoksinükleotid trifosfatların konsantrasyonunda bir azalmanın yanı sıra pirofosfat konsantrasyonunda bir artış yoluyla meydana gelir (Şekil 3).

Riznovidi PLR

Kongre PLR'si

PLR reaksiyonunun bu versiyonunda daha sonra döngü sayısı (30-40) seçilir ve ardından reaksiyon karışımında volkanik DNA moleküllerinin birikiminin birikip birikmediği analiz edilir.

Varisli damarlar durumunda PLR'yi teşhis yöntemi olarak evrelemeye yönelik bu seçenek açık bir yöntemdir. Olumlu bir reaksiyon, görüntüde bulunan DNA moleküllerinin izlerinin varlığını gösterir. Varlığı hakkında bilgi vermek için olumsuz tepki. Çıktı DNA moleküllerinin niceliksel bir değerlendirmesi, bir platoya verilen yanıt yoluyla imkansızdır.

Ürünü tanımlamanın ana yöntemi agaroz veya poliakrilamid jeller üzerinde elektroforezdir. PLR ürünleri, moleküler ağırlıklarını azaltmak için elektrik alanı altında bir jel içerisinde ayrılır. Jel, ara katmanlaşan kızamık (DNA'ya bağlı durumda floresan - çoğunlukla bromür etid) içerir. Böylece ultraviyole ışığa maruz kaldığında gerekli moleküler kütleye sahip DNA'yı gösteren bir işaretin varlığını veya varlığını tespit etmek mümkün olacak. Teşhis amacıyla PLR'nin gerçekleştirildiği saat boyunca reaksiyonun pozitif ve negatif kontrolü her zaman devreye alınır ve bu da aynı işaretlerle sonuçlanır (böl. Şekil 4).

Gerçek zamanlı PLR

PLR üretiminin bu versiyonunda, reaksiyon karışımındaki PLR ürününün gücü, reaksiyon süresince sürekli olarak kaydedilir. Bu, bir reaksiyon eğrisi oluşturmayı (böl. Şekil 3) ve bundan yola çıkarak parçacıklardan bir dizi farklı DNA molekülünü çıkarmayı mümkün kılar.

Gerçek zamanlı olarak gerçekleştirilen PLR türlerinden biri, doğrudan reaksiyon karışımına eklenen vikoristik bir interkalasyon maddesinin (çoğunlukla vikoristik SYBRGreen) kullanılmasıdır. Diğer bir tür ise, PLR ürününün ortasındaki boşluğa bağlanan floresan prob türlerinden birinin kullanılmasıdır, bu da tespitin özgüllüğünün arttırılmasına olanak tanır (böl. Şekil 5). Reaksiyon sırasında floresans tespiti sürekli olarak gerçekleştirilir.

Hızlı tespit imkânının yanı sıra, gerçek zamanlı PLR'nin diğer avantajları da konvansiyon doğrultusunda ortaya çıkıyor. PLR'nin bu versiyonu daha basit, daha hızlıdır ve aynı zamanda PLR ürünleriyle tüplerin açılmasını gerektirmez, bu da diğer parçacıkların kontaminasyonunu azaltır. Ana dezavantaj, orijinal ile karşılaştırıldığında artan floresans tespit yeteneği nedeniyle amplifikatörün daha yüksek performansıdır.

Dijital Kilkisna PLR

Bir numunedeki DNA'nın gücünün daha doğru bir şekilde belirlenmesini mümkün kılan yeni, pahalı ve hala düşük genişlikte bir PLR çeşidi. Bu versiyonda, floresan barnberry içeren karışımın reaksiyonu çok sayıda mikroskobik hacme (örneğin bir emülsiyondaki damlacıklara) bölünür. PLR uygulandıktan sonra damlacıkların hangi kısmının pozitif reaksiyona sahip olduğu analiz edilir ve görünüşe göre floresans gözlenir. Bu kısım her bireyde bulunan DNA moleküllerinin sayısıyla orantılı olacaktır.

Ters transkripsiyondan PLR

PLR'nin bundan veya başka bir versiyonundan önce, ters transkripsiyonun (RNA'dan DNA'ya) revertaz enzimi yardımıyla reaksiyonu inhibe edilir. Böylece bu yöntem RNA moleküllerinin kesin olarak tanımlanmasına olanak sağlar. Bu, RNA virüslerini tespit etmek veya belirli bir genin transkripsiyon düzeyini (mRNA) belirlemek için kullanılabilir.

Malyunok 1. Etapi PLR. Astarlar kırmızı renkle işaretlenmiştir.

Malyunok 2. PLR sırasında primerlerle çevrelenmiş çift DNA moleküllerinin birikmesi.

Malyunok 3. Numunede bulunan farklı DNA molekülü konsantrasyonlarında PLR reaksiyonunun dinamiği. (a) – en yüksek konsantrasyon (b) – orta konsantrasyon (c) – en düşük konsantrasyon

Malyunok 4. PLR ürünlerinin agaroz elektroforezi. K+ - pozitif kontrol (tespit edilen DNA'nın varlığının arkasında). 1-7 - diğer izler (bunlardan 1-2'si pozitif, 3-7'si negatiftir). K-negatif kontrol (video dna sukana DNA). Çoğu durumda, ürünün tamamına ek olarak, daha fazla hafif spesifik olmayan reaksiyon ürünleri (primer dimerler) görülebilir.

Malyunok 5. Saatte vikoristannya PLR saatinin altında tespit yöntemleri. (a) – interkale edilmiş barnberry – döner DNA'ya bağlandığında floresans verir (b) – Taqman probu – DNA probu, söndürücü olan floroforun tabanında 5'-3' endonükleaz aktivitesine sahip bir DNA polimeraz tarafından bölündüğünde floresans meydana gelir. (c) – MolecularBeacon probu - tüm parça uzak florofor ve söndürücü boşluğunun arkasında olacak şekilde probun hibridizasyonu sırasında floresan görünür (d) – LightCycler probları - aktarılan probların hibridizasyonu sırasında alıcının floresansı görünür ( FRET).

Polimeraz zincir reaksiyonu (PLR, PCR – polimeraz zincir reaksiyonu), biyolojik bir virüsten DNA parçalarının (genlerin) anonim kopyalarını çıkarmak için kullanılan bir yöntemdir.

Bir moleküler biyoloji yöntemi olarak PLR'nin özü, beyindeki özel enzimlerin yardımıyla şarkı geninin (DNA uzantısı) büyük ölçekli örnek kopyasında yatmaktadır. laboratuvar ortamında. PLR'nin önemli bir özelliği, belirli bir zihne karşılık gelen belirli bir DNA parçasının (gen) bir kopyasının çıkarılmasıdır. DNA kopyalama işleminin eşanlamlısı "amplifikasyon" dur. DNA kopyalama in vivo Amplifikasyonu da kullanabilirsiniz. Ancak replikasyon sonucunda Lancug polimeraz reaksiyonu sırasında DNA'nın kısa bölümleri (maksimum 40.000 nükleotid çifti) çoğaltılır.

Temel prensipler

Ayrıca PLR, tekrarlanan sıcaklık döngüleri sırasında DNA parçalarının in vitro karbonaz kopyalanmasıdır. Reaksiyon süreci bir sıcaklık döngüsünde nasıl gerçekleşir?

Nükleotid mızrağının sentezi DNA polimeraz enzimi tarafından gerçekleştirilir. Ancak koçanın çalışabilmesi için enzimin bir başlangıç ​​platformuna ihtiyacı vardır. Maidan'lar gibi, "primerler" (tohumlar) 15-20'ye kadar nükleotid içeren sentetik oligonükleotidler gibi davranır. İki primer (ileri ve geri) vardır, bunlar DNA şablonunun bölümlerine tamamlayıcıdır ve primerlerle çevrelenen DNA fragmanının kendisi, DNA polimeraz tarafından kopyalanır. Polimerazın çalışması, DNA şablonu dizisine tamamlayıcı nükleotidlerin sıralı olarak eklenmesinde yatmaktadır. Tim'in kendisi, bir sıcaklık döngüsünde tekrar iki yeni DNA parçasını sentezler (DNA molekülü Dolantsyuzhkova olduğundan, o zaman iki matris vardır). Böylece, 25-35 döngüden fazla örnek, primerler tarafından tanımlanan DNA grafiğinin milyarlarca kopyasını biriktirir. Kapalı bir çevrimin yapısı şu şekilde temsil edilebilir:

  1. DNA denatürasyonu (DNA mızraklarının erimesi, parçalanması) – 95°C – 1 veya 2 hvilin;
  2. primerlerin düşmesi (primerler DNA şablonuna bağlanır, bu aşamanın sıcaklığı primerin nükleotid bileşimi ile belirlenir) - 60 ° C (örneğin) - 1 hvilina;
  3. DNA uzaması (polimeraz DNA'yı sentezler) - 72°C - 1 saat (parça sentezlenene kadar bir saat bekletin).

Laboratuvarda polimeraz Lanziug reaksiyonu yöntemini test etmenin pratik temeli aşağıdakilerden oluşmalıdır:

  1. (veya termal döngüleyici olarak adlandırılan başka bir şey);
  2. s sistemleri (PLR sonuçlarının görselleştirilmesi için);
  3. sistemler (PLR sonuçlarını analiz etmek için);
  4. (Numune hazırlama için);
  5. set (mekanik ve elektronik).

PLR laboratuvarının tam işleyişi için ana ve yardımcı ekipmanlara ek olarak gerekli malzemeler de mevcuttur: steril uçlar, tüpler, tüpler ve dağıtıcılar için raflar.

Tam teşekküllü bir polimeraz Lancug reaksiyonunu gerçekleştirmek için ilk PLR laboratuvarındaki reaktif bazı, bir tamponlu DNA polimeraz enzimini, primerleri (analiz edilen d DNA matrisinin çekirdeğini ve ucunu tamamlayıcı küçük sentetik DNA fragmanları), toplamını içerir. nükleotidler (A, T, G, C) . Arıtılmış su da kesinlikle gereklidir.

PLR yönteminin avantajları

Yüksek soruşturma hassasiyeti

Yöntemin hassasiyeti, PLR'nin amplifikasyonunun ve hedef dizinin tanımlanmasının, her 5 hücrede bir meydana gelmesi durumunda elde edilebilecek şekildedir.

Analizin özgüllüğü

PLR, spesifik bir bulaşıcı ajanın DNA'sını, diğer mikroorganizmaların DNA'sı ve konakçı organizmanın DNA'sı varlığında tespit etmeyi ve ayrıca genotiplemeyi gerçekleştirmeyi mümkün kılar. Reaksiyon bileşenlerini (primerleri) özel olarak seçerek ilgili mikroorganizmaların DNA'sını anında tespit edebilirsiniz.

PLR yönteminin çok yönlülüğü

Sağda, insanlarda bulaşıcı hastalıkların ve hastalık salgınlarının PLR teşhisi için aynı bilgiyi kullanabilir, numunelerin (numunelerin) hazırlanması ve analizin gerçekleştirilmesi için evrensel prosedürlerin yanı sıra benzer reaktif setlerini takip edebilirsiniz.

Zaman kazanmak

PLR'nin önemli bir avantajı kültürel mikrobiyolojik çalışmanın aşamalarının sayısıdır. Numunelerin hazırlanması, reaksiyonların gerçekleştirilmesi ve sonuçların analiz edilmesi, maksimum rahatlama ve birçok otomasyon. Her durumda sonuçlar hızla 4-5 yıla düşebilir.

PLR yönteminin verimliliği

İncelenen klinik materyalin genişliği

Polimeraz Lanczyg reaksiyonunun bir sonucu olarak hastalıktan sadece biyolojik materyal değil, aynı zamanda DNA moleküllerinin yüksek hassasiyetle tanımlanabildiği birçok başka substrat da hastalıktan uzaklaştırılabilmektedir. Bu örneğin su, toprak, gıda ürünleridir. , mikroorganizmalar ve çok daha fazlası.

Bu benzersiz yöntemin en önemli avantajları arasında yüksek duyarlılık ve özgüllük, enfeksiyöz ajanın tanımlanması ve herhangi bir insan geninin genotiplenmesi, yüksek verimlilik ve zaman tasarrufu, evrenseldir. Pratik bir temeli vardır - mevcut PLR yöntemi klinik teşhiste yaygın olarak kullanılabilir. , tıbbi uygulama ve diğer alanlardaki bilimsel araştırma ve zenginlik.

Zastosuvannya PLR

Mevcut moleküler biyoloji yönteminin bir sonucu olarak polimeraz Lancug reaksiyonunun durgunluk alanları çeşitlilik göstermektedir. Analiz edilebilecek materyalin genişliği (DNA'nın daha net görülebildiği hemen hemen her şey araştırma konusu olabilir) ve seçilen primerler açısından zengindir. PLR uygulamasının ana alanları:

klinik ilaç

  • bulaşıcı hastalıkların tanısı
  • Durgunluk hastalıklarının teşhisi
  • mutasyonlar tespit edildi
  • genotip
  • klinik teknolojiler
  • genetik pasaportların oluşturulması

ekoloji

  • dovkilla'nın gelişimini izlemek
  • gıda ürünleri analizi
  • genetiği değiştirilmiş organizmaların (GDO'lar) analizi

gemi hekimliği ve adli tıp

  • Bireysel kimlik
  • Anavatan'ın kuruluşu

farmakoloji

Veteriner

bilimsel araştırma (moleküler biyoloji, genetik)

PLR laboratuvarının organizasyonu

Sözleşmeye ilişkin bilgiler

İsim HakkımızdaVirobnitstvoYöntem Kat.No.

PLR - enfeksiyonların teşhisi, çeşitli bulaşıcı hastalıkların tespitinde hızlı ve yüksek hassasiyetli bir yöntem. Diğer analizlerden farkı nedir?

Bu kısaltma, bir polimeraz Lanzug reaksiyonu olarak deşifre edilir. Wikipedia'ya göre Keri Mullis, Amerikan tarihinde 1983'te doğdu. Katkılarından dolayı Nobel Ödülü reddedildi.

Son kez, PLR yalnızca bilimsel yöntemi kullanarak galip geldi ve ardından tıp tarafından başarıyla kuruldu. Araştırmanın özü, bulaşıcı ajanın DNA ve RNA temelinde tanınmasında yatmaktadır. DNA'ya nüfuz eden cilt hastalığı, yapısını farklı türüne değiştirir. Laboratuvar asistanı, değiştirilmiş DNA'yı görünce insanlarda hastalıkların nasıl meydana geldiğinin farkına varır. PLR'nin diğer avantajları arasında:

  1. DNA'daki "izi" kaybeden enfeksiyonun birincil nedeninin belirlenmesi. Pek çok hastalık tanımlandığında, her şeyin başladığı yeri belirlemek önemlidir. Doğru tanı ve etkili tedavinin seçimi için Lanzug reaksiyonu çok büyük önem taşımaktadır;
  2. DNA değiştikçe ve dönüşümün belirli bir aşamasında PLR'ye kurulur. Şüpheli enfeksiyonları dışlamak için bu gereklidir;
  3. PLR teşhisi hassastır ve tek bakteri ve virüslerin varlığını tespit eder. Yanlış reçete edilen bir banyodan veya banyoya plansız bir şekilde ara verilmesinden sonra kokular kanda kaybolabilir. PLR'nin kodunu çözerken teşhis edilen minimum miktar 10 müşteri günüdür. Diğer test yöntemleri daha küçüktür;
  4. PPSS semptomlarının tezahürüne bağlı olarak patojen mikroorganizmalar tespit edilir. Erken dönemde tespit edilen hastalık, ileri hastalık kadar uzun sürmez;
  5. Hastalıkların PLR sonuçları, hızlı bir şekilde bitirmek için ele alınacaktır. Enfeksiyonların teşhis edilmesi 4-6 yıldan biraz daha uzun sürüyor. Şifre çözmeyle birlikte tüm süreç 1-2 günden biraz fazla sürüyor;
  6. Bir seferde 5-6 testin gerçekleştirilmesi için DNA materyali çıkarılır. Hasta bir kişinin defalarca smear yaptırma şansı olmayacaktır;
  7. PLR ve enfeksiyon takibi durmuyor, bu alan giderek gelişiyor. Hassasiyeti artan yeni test sistemlerinin keşfedilmesiyle takip yapılma ihtimali azalıyor. Daha önce sadece mega şehirlerin sakinleri için mevcut olduğundan, artık bölgelerdeki hastane kliniklerindeki doktorlar, hastalıkları onsuz tedavi etmeyi hayal edemiyorlar.

PLR yönteminin özellikleri:

  1. Doğruluk (düzeltmeler minimum düzeydedir ve sıklığı %0,01'i geçmez);
  2. Hassasiyet (test, kandaki ve smearlardaki tek tek bakterileri "sayar");
  3. Özgüllük (PLR, genellikle önemli bir aşamaya kadar kendini göstermeyen enfeksiyonları tespit eder);
  4. Benzersizlik (diğer araştırmaların hiçbir şey ortaya çıkarmadığı durumlarda sonuçların analizi).

PLR analizinin sonuçları

Lanzug reaksiyon yöntemi nasıl çalışır ve analiz öncesi nasıl hazırlanırsınız?

Laboratuvar beyinlerindeki Lanzug reaksiyonu, aynı hasarlı kısmı tanımlayarak zengin DNA ve RNA alanlarının çoğalmasını iletir. Asitler enzim preparatları yardımıyla çoğaltılır (konjuge edilir). Vikoristik enzimler kullanarak laboratuvar asistanı, PLR'yi bu semptomların ve enfeksiyonun neden olduğu diğer hastalıkların semptomlarından hizalamak için patojenik DNA fragmanının yeterli kopyasını çıkarır.

Kural olarak numune alma veya smear yoluyla alınan biyolojik materyaller teste tabi tutulur. Tanımlama için (cinsel yolla bulaşan enfeksiyonların şifresini çözmek), PLR için epidermis, serviks veya uterustan bir smear alınır. Bazen vikoristler de kavga eder.

Hepatit, toksoplazmoz veya HIV varlığını doğrulamak veya tespit etmek için damardan kan alın. Parmaktan alınan kan sıklıkla süt negatif sonuç verir. Mononükleoz tanısı katır boğaz materyali toplandıktan sonra konur. Yaralı hastalarda açıkça görüldüğü gibi balgam toplanmasından sonra tüberküloz tespit edilebilmektedir.

PLR için rahim ve rahim ağzından smear alınması basit bir analizdir, bununla dalga geçmeye gerek yok. Etkinlikten 2-3 gün önce resmi bir hayat yaşamaya teşvik edileceksiniz. Günümüzde özel hijyen amacıyla doğal bazlı jeller ve sütler kullanılmaktadır. Musluktan ılık su içebilirsiniz. Yıkamayı bırakın - yaradan önceki akşam laboratuvara veya doktorun ofisine gidin.

Pamukçuk'un kremler, merhemler, fitiller ve spreyler yardımıyla tedavi edilmesi de önemlidir. Menstruasyondan hemen sonra veya hemen sonra ilk pelvisten smear alınır. Doğru sonuç alabilmek için PLR smear alınmadan önce 2-3 yıl tuvalete gidilmemesi tavsiye edilir.

Lanziug reaksiyonu olan kişilerde üretradan örnek alınır. Biyolojik materyal, tohumun içine yerleştirilen steril bir prob veya pamuklu çubuk kullanılarak toplanır. İşlemin yapıldığı saatte hafif bir rahatsızlık veya karaciğerde şişlik hissedebilirsiniz. İnsanların ayrıca seks ve hijyen hakkında bilgi edinmek için çok zaman harcaması gerekiyor. Analizden önceki süre, antibiyotik ve diğer ilaçlarla tedavi reçete edilir. Toplama sonrasında rahatsızlık devam ediyorsa en kısa sürede kliniğe gidilmesi önerilir.

Hastaya kan tahlili yapılması veya hastanın organlarından smear alınması kabul edilebilir. Genetik materyal bir PLR amplifikasyon cihazına yerleştirilir ve buraya enzimler eklenir. DNA, kordon şiş haline gelinceye kadar 90-95°C'ye ısıtılır. Bu sürece denatürasyon denir. Reaktörün çalışma saati boyunca, bir DNA ve RNA örneğinden analiz için binlerce kopya oluşturulur (reaksiyonun şifresi çözülür).

PLR tanısının sonuçları

Lanzug reaksiyonu, enfeksiyonun ciddiyetini ve tam olarak bariz komplikasyonların sayısını gösterir. Geriye kalan kayaların çözülmesi, genotipi değiştirme yeteneğini ortaya çıkarmak amacıyla mutasyon genlerinin insan DNA'sına bireysel olarak yerleştirilmesidir.

PPR enfeksiyonu tanısı neyi ortaya koyuyor?

Analiz sonuçlarının kodunun çözülmesi, uzman doktor tarafından açıkça görülebilir. Lanczyg reaksiyonunun gücü, bu tür hastalıkların varlığını doğrulamamıza veya tespit etmemize olanak tanır:

Bu listeden de anlaşılacağı gibi, PLR teşhisleri doktorlara sınırlı yeteneklere sahip olmaksızın çok çeşitli yüksek düzeyde uzmanlaşmış uzmanlıklar sunmaktadır. Yöntem göğüs hastalıkları, viroloji, bulaşıcı hastalıklar, onkoloji, gastroenteroloji, hematoloji, jinekoloji ve üroloji alanlarında kullanılabilir.

PLR şifre çözme: sonuçlar

Lancug reaksiyonunun analizleri, bariz patolojileri ve kronik hastalıkları olan bir cilt hastası için doktorlar tarafından ayrı ayrı değerlendirilir. PLR analizlerinin sonuçları yukarıda da söylendiği gibi patojenik bakterilerin spesifik özelliklerini göstermektedir. Doktor bunlarla uğraşırken hastalığın ciddiyet aşamasını ve evresini belirler. Bu göstergelere dayanarak, ilaçların dozajı ve tedavi süresinin süresi ayrıca belirtilir.

Negatif bir PLR sonucu, toplanan biyolojik materyalin her gün herhangi bir virüs veya enfeksiyon gösterdiği anlamına gelir. Pozitif PLR, alarm öncesi bir sinyaldir. Ayrıca hastanın kanında ve diğer biyolojik alanlarında da enfeksiyon tespit edildi.

Değerler minimum olduğundan, yalnızca hastalığın aktif gelişimi hakkında değil, hastalığın basit varlığı hakkında da konuşabilirsiniz. Yalnızca PPR'de kendini gösteren, ancak olağan diğer semptomları göstermeyen basit bir enfeksiyon taşıyıcısı, sürekli olarak bir doktora danışılmalıdır.

Paniğe kapılmamak ve bilim tarafından bilinen çoğu virüsün antibakteriyel ilaçlarla tedavi edilebileceğini hatırlamak önemlidir. Etkisizlik durumunda bunları seçmek ve birini başkasıyla değiştirmek, bu ve diğer hastalıkların tedavisinde de görüldüğü gibi, doktorun niteliklerinden yoksun kalmasına neden olabilir.

PLR'nin şifresinin çözülmesi yalnızca doktorun takdirine bağlı olarak değil, yetkililerin takdirine bağlı olarak da gerçekleştirilebilir. Çoğu zaman cinsel yolla bulaşan hastalık olasılığını önlemek için yakın gelecekte hamile kalmayı planlayan kadınlardan korkarız. Hastayla bölgesel konsültasyona konulduğunda ayrıntılı bir tanıya gerek yoktur.

PLR, az sayıda kürtaj yaptıran veya çeşitli nedenlerle kürtaj yaptıran zorunlu kadınlara reçete edilir. EBC'den önce döllenmiş yumurtanın olası atılmasının tüm nedenlerini belirlemek için bir analiz yapılır.

İnsanlar genellikle serbest bırakıldıktan sonra, bir tür tatil romantizmi veya düğün saatinde PLR ​​gerçekleştirirler. Teşhis onların hayatlarını ve potansiyel cinsel partnerlerinin sağlığını tehlikeye atmamalarına yardımcı olur.

Gereksiz riskin zorlu bir yolculukla karmaşık hale gelmesi durumunda, çoğu zaman PLR, bir hastanın embriyonik aşamada hastalıktan kurtulması için tek şanstır.

Bulaşıcı hastalıkların teşhisi için PLR yöntemini kullanan bir yayma daha önemli hale gelebilir:

  • Bulaşıcı hastalıkların ve hastalıkların doğrudan teşhisi.

Birçok geleneksel laboratuvar teşhis yöntemi, çeşitli dolaylı işaretler için günlük hastalıkların tespitine dayanır. Örneğin, ELISA teşhisi, hastanın kanında tespit edilen, bulaşıcı ajanların parçalanmasının ürünleri olan ve doktorun başka bir teşhis koyabileceği proteinlere dayanmaktadır. PLR analiz yöntemi, hastadan alınan materyalde hastalığa ait spesifik bir DNA örneğinin varlığının doğrudan göstergesini sağlar.

  • PLR teşhisinin yüksek özgüllüğü.

Analiz süreci sırasında, incelenen materyal, bakteri veya virüs gibi belirli bir organizmaya özgü ve güce sahip bir DNA parçasını ortaya çıkarır. Bu DNA parçası benzersizdir ve dünyadaki bir hayvan enfeksiyonu için tipik değildir.

  • PLR'nin yüksek hassasiyeti.

Hastadan alınan materyalin birden az hücre bakteri veya virüs içermesi durumunda enfeksiyonlar meydana gelebilir. Diğer immünolojik ve mikrobiyolojik teşhis yöntemleriyle karşılaştırılabilir: PLR analizinin duyarlılığı - numune başına 10-100 hücre, diğer yöntemler - 103-105 hücre.

    0Array (=> Analizler) Array (=> 2) Array (=>.html) 2

  • PLR analizinin çok yönlülüğü.

PLR araştırması için, diğer yöntemlerle inceleme için mevcut olmayan herhangi bir materyalin pratik olarak kullanılması mümkündür: mukus, kesikler, kan, serum, balgam, ejakülat, epitel hücrelerinin kazıntıları - enfeksiyon parçaları Herhangi bir biyolojik materyalin içine yerleştirilebilir. ve kumaşlar.

  • PLR analizinin sonuçları için yüksek derecede destek vardır.

Analiz için hastadan alınan materyalin tüm işlenmesi, reaksiyon ürünlerinin tespiti, otomatik PLR amplifikasyonu için tek tip bir yöntem, 4-5 yıl içinde yeni bir PLR tanısına olanak sağlar. Aynı zamanda, kültürel gözlem yöntemlerine bir saatten çok daha fazla zaman harcanıyor - birkaç günden birçok güne kadar, hücre kültüründe patojeni görmek ve ardından geliştirmek gerekiyor.

  • Her türlü enfeksiyonu teşhis etme imkanı.

PLR yönteminin yüksek duyarlılığı, enfeksiyonun yalnızca hastalığın akut aşamasında teşhis edilmesini değil, aynı zamanda kronik enfeksiyonların tespit edilmesini ve tek bakteri ve virüslerin tanımlanmasını da mümkün kılar.

PLR yöntemini kullanan bir smear, flora smear ile tespit edilemeyen enfeksiyonları tespit etmeyi mümkün kılar: klamidya, ureaplasmosis, mikoplazmoz, genital herpes.

Araştırma yönteminin ve PLR ​​teşhisinin önemli avantajları nelerdir? PLR teşhisinin eksiklikleri şunları içerir:

  • Olumlu bir sonuç elde etme olasılığı

Enfeksiyon zaten ölüyse, antibiyotikler tarafından "öldürülmüşse" ve ölü hücreler hala hastanın dokularında bulunuyorsa PLR analizi pozitif sonuç gösterebilir. Bu nasıl mümkün olabilir? Oldukça basit. Örneğin enfeksiyon, epitel dokularında (organların veya gözlerin mukozasında) yaşar. Her ikisi de bundan keyif aldılar. Hücrelerin epitelinin “yenilenmesi” bir saat sürer. Malzeme, hücreler tamamen yenilenmeden doktor tarafından alınırsa, malzemede enfeksiyona bağlı ölü hücreler bulunabilir. Açıkçası Klitini, PLR'nin düşündüğü gibi vücudun DNA'sı veya RNA'sı olan genetik materyali ortadan kaldırıyor. PLR, ölü hücreleri canlı olanlardan ayırmaz: DNA'yı arar ve onları çok sayıda "klonlar". Böyle bir analizin sonucu olumludur. Aslında hipnopozitif olduğumuz doğrudur.

PLR'nin ölü bir enfeksiyonu canlı bir enfeksiyondan "kurtaramaması", PLR'yi tespit etmeyi ve tedavinin etkinliğini kontrol etmeyi zorlaştırır. Elbette ana kural, ortalama bir insanın 4-8 yıl hayatta kaldığı enfeksiyonun ölü fazlalıklarının vücuttan tamamen atılmasını sağlamaktır. Bu nedenle kalan antibiyotik tabletlerinin alınmasından sonra tedavinin etkinliğini izlemek için PLR yöntemi kullanılabilir ve kullanılmalıdır.

gastroenteroloji teşhis kompleksi - 5360 ruble

TILKI IN BEREZNY tasarruf - %15

1000 ruble EKG'yi kod çözme işleminden alma

- 25%öncelik
bir doktora görün
hafta sonları terapist

980 ovmak. bir hirudoterapistle ilk randevu

bir terapistle randevu - 1130 ruble (dönüşümlü olarak 1500 ruble) "Yalnızca hafta içi, cumartesi ve haftalarda% 25 indirimli bir terapistle görüşmek - 1500 ruble yerine 1130 ruble (teşhis prosedürleri fiyat listesine göre ödenir)

Daha sonraki bir aşamada, yasaklamanın kontrolü farklı bir kültürel yöntem kullanılarak veya ekim yoluyla yapılabilir: yalnızca üreyen canlı mikroorganizmalar şiddetsizliğin bir işareti olarak hizmet edebilir.

  • Gardnerelloz tanısı için PLR analizinin kullanılması tavsiye edilmez, çünkü gardnerelli - bu hastalığın hastaları az sayıda vakada normalde toprakta yaşar. Vikoristik PLR'ye sahip bu bakterilerin DNA'sı yakında kaybolacak. Gardnerella yaymada görünmüyor ve bu durumda bakteriyoskopi, gardnerellozun teşhisi ve tedavinin izlenmesi için yeterli bir yöntemdir.
  • Çeşitli mikroorganizmalar

Her mikrop değişebilir, hem de DNA gibi. Bu galusun en güzel poposu grip virüsüdür. Bir kez hastalanan kişi virüse karşı antikor geliştirir. Tamamen teorik olarak, bir kez bile olsa gribe yakalanırsak, tıpkı gripte olduğu gibi tekrar hastalanmamız bizim suçumuz değil. Neredeyse boğazımız ağrıyor. Nedeni ne? Virüs, genomunu hafifçe "değiştirerek" "mutasyona uğrar" ve bağışıklık sistemimiz, antikorlarımız artık eski konuğu yeni bir görünümle "tanımaz". Tekrar tekrar gribe yakalanmam hiç de çılgınca değil...

Bir amplifikatör (PLR test sistemi) tasarlanırken, belirli bir mikroorganizmaya özgü, değişime en az duyarlı olan bir DNA parçası seçilir. DNA'nın son derece muhafazakar olarak adlandırılan bölümünden "seçilir". Alternatif olarak, mikroorganizmaların bolluğu, gözlemlenen organizmanın belirli genotiplerinin veya suşlarının, genomda çoğalan (klonlayan) mutasyonlara neden olabilmesine ve dolayısıyla test sistemi tarafından yakalanmamasına neden olabilir.

Dolayısıyla farklı laboratuvarlarda ve farklı kliniklerde aynı PLR yöntemi kullanılarak yapılan analizlerin taban tabana farklı sonuçlar gösterebilmesinin nedenlerinden biri de farklı test sistemleridir. Mutasyonları mümkün olduğunca önlemek amacıyla, test sistemlerinin kullanımını gerektiren testleri (çapraz reaksiyonların doğrulanması ve aynı zamanda belirtilen hastalığın evdeki suşlarının test edilmesi dahil) düzenlemek üzere standartlar geliştirilmiştir. ve , her şeyden önce piyasaya harcayın ve Vicoristan sağlığınızı teşhis etmek için kullanılacak mı? İyi klinikler ve laboratuvarlar neden geri kalan test sistemleri için Vicoristan'ı kullanıyor? Ve tıp merkezimiz “Euromedprestige”, müşterilerine net teşhisler sunabilen az sayıdaki merkezden biridir.